EFECTO DEL BDNF SOBRE LA VIABILIDAD DE ASTROCITOS

JULIETA SABA; DELIA RAMÍREZ; LILA CARNIGLIA; DANIELA DURAND; MERCEDES LASAGA; CARLA CARUSO

Mar del Plata

Congreso; Congreso SAIC; 2013

SAIC

El factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) es una neurotrofina que promueve el desarrollo y la supervivencia neuronal. También es un factor protector ya que inhibe la apoptosis de neuronas y de oligodendrocitos. Dado que poco se sabe del efecto del BDNF en los astrocitos, decidimos estudiar los efectos del BDNF sobre la viabilidad de astrocitos. Para esto utilizamos cultivos primarios de astrocitos de rata que fueron incubados por 24 h con BDNF y evaluamos la viabilidad por la técnica de MTT. El BDNF 20 y 50 ng/ml aumenta la viabilidad de los astrocitos de manera dosis dependiente (p menor a 0.05). Por otro lado, el BDNF no modifica la viabilidad de una línea celular de glioma de rata C6, demostrando que este efecto es específico para cultivos primarios. También evaluamos los mecanismos involucrados en esta acción del BDNF en astrocitos. Para esto incubamos a los astrocitos con inhibidores de distintas vías como de las MAPKs ERK o de la vía PI3K/Akt en presencia de BDNF por 24 h. El efecto estimulatorio del BDNF (50 ng/ml) sobre la viabilidad de los astrocitos fue bloqueado por inhibidores de ERK (PD98059 10 uM) y de Akt (0,5 mM) pero no por un inhibidor de la PKA (Rp-cAMP 50 uM). Determinamos la activación de ERK y Akt midiendo sus formas fosforiladas (pERK y pAkt) y totales en astrocitos tratados por 30 min con BDNF por la técnica de Western blot. El BDNF indujo un aumento dosis dependiente de los niveles de pERK y pAkt, confirmando la participación de estas proteínas en sus efectos. Por otro lado, determinamos el efecto del BDNF sobre las distintas fases del ciclo celular de los astrocitos. Luego de 24 h, el BDNF (50 ng/ml) indujo un aumento del porcentaje de células en fase S y en fase G2 (Control: S: 2,8%, G2: 41.25%; BDNF S: 4%, G2: 56,2%), lo que sugiere que esta neurotrofina podría inducir la proliferación de los astrocitos. Estos resultados indican que el BDNF podría jugar un rol importante en la supervivencia y/o proliferación de los astrocitos a través de ERK y Akt.