Efecto antioxidante de alfa-msh en cultivos primario de astrocitos

DELIA RAMÍREZ; LILA CARNIGLIA; JULIETA SABA; DANIELA DURAND; CARLA CARUSO; MERCEDES LASAGA

Mar del Plata

Congreso; Reunion anual de la sociedad argentina de investigacion clinica; 2014

SAIC

Los procesos inflamatorios en el sistema nervioso central (SNC) contribuyen en gran medida al desarrollo de enfermedades neurodegenerativas y el estrés oxidativo ha sido implicado en la pérdida de neuronas en la progresión de dichas enfermedades. Los astrocitos son las células con mayor capacidad antioxidante del SNC y proveen a las neuronas de los precursores de glutatión (GSH), principal compuesto antioxidante a nivel cerebral. Las melanocortinas son neuropéptidos con acciones antiinflamatorias y neuroprotectoras. Previamente demostramos que la hormona alfa melanocito estimulante (alfa-MSH) ejerce una acción antiinflamatoria a través de los receptores MC4 en astrocitos. Dada la importancia de desarrollar nuevas estrategias terapéuticas focalizadas en la regulación de los mecanismos antioxidantes, decidimos evaluar el efecto antioxidante de las melanocortinas en astrocitos utilizando NDP-MSH, un análogo sintético de alfa-MSH. Para ello, realizamos cultivos primarios de astrocitos de rata que fueron incubados por 24 h con NDP-MSH 0,1 uM y evaluamos los niveles intra y extracelulares de GSH a través la sonda fluorescente monoclorobimano. NDP-MSH no modificó los niveles intracelulares de GSH, en tanto que aumentó sus niveles extracelulares en un 21,2% (p menor a 0,001). Además determinamos la actividad de gamma-glutamilcisteinil ligasa (gamma-GCL), enzima limitante en la síntesis de GSH, mediante un ensayo de fluorescencia. Observamos un incremento del 44,5% de la actividad de la enzima (p menor a 0,001) luego del tratamiento con NDP-MSH. También se determinó la actividad de la enzima superóxido dismutasa (SOD) mediante la técnica de auto oxidación de adrenalina. En este caso NDP-MSH indujo un aumento del 52,7% de la actividad de dicha enzima (p menor a 0,05). En resumen, NDP-MSH ejercería un efecto antioxidante modulando la actividad de gamma-GCL y SOD, y estimulando la liberación de GSH, contribuyendo así al efecto neuroprotector de las melanocortinas.