Vías de señalización del MC4R en astrocitos

CARUSO CARLA; CARNIGLIA LILA; DURAND DANIELA; LASAGA MERCEDES

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

SAIC

Las melanocortinas (ACTH, alfa-, beta- and gamma-MSH) son neuropéptidos con acciones anti-inflamatorias y neuroprotectoras. Se identificaron 5 subtipos de receptores (MCRs), de los cuales el MC3R y el MC4R son los que se expresan en el cerebro. Previamente demostramos que la alfa-MSH ejerce una acción anti-inflamatoria a través del MC4R en el hipotálamo de ratas macho y en astrocitos. Los astrocitos expresan el MC4R, siendo el único MCR presente en estas células. Recientemente, demostramos que la activación del MC4R por el análogo NDP-MSH induce la expresión del factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) a través de la vía AMPc-proteína quinasa A-CREB en astrocitos. En el presente trabajo, investigamos otras vías de señalización utilizadas por el MC4R en astrocitos. Para esto preincubamos por 15 min a las células con inhibidores de proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPKs) y de la fosfatidil inositol 3 quinasa (PI3K)/Akt. Luego, los astrocitos fueron incubados por 1 h con NDP-MSH y se determinaron los niveles del ARNm de BDNF por real time PCR. Dentro de las MAPKs, solo el inhibidor de las ERKs (PD98059 10 uM) bloqueó el aumento en la expresión del BDNF inducido por NDP-MSH (Control: 1,000±0,108; NDP-MSH: 2,034±0,020**; PD: 1,175±0,006; NDP-MSH+PD: 1,304±0,014; **p0.01). Por otro lado, la presencia del inhibidor de la PI3K (LY294002 20 uM) disminuyó la expresión basal de BDNF así como la inducida por NDP-MSH (Control: 1,000±0,052; NDP-MSH: 1,802±0,214*; LY: 0,804±0,063*; NDP-MSH+LY: 0,927±0,129; *p0.05). Sin embargo, el inhibidor de Akt (0.5 uM) no modificó los niveles del ARNm de BDNF basales o inducidos por NDP-MSH. Además, medimos la fosforilación de ERK por western blot en extractos proteicos de astrocitos tratados 30 min con NDP-MSH. pERK1y2 aumentó en presencia de la NDP-MSH. Estos resultados sugieren que la activación del MC4R en astrocitos, además de activar la vía cAMP-PKA-CREB, induce la vía de las ERK1/2 y de la PI3K pero independientemente de Akt.