ERK1/2 PARTICIPA EN LA INDUCCIÓN DE NUR77 POR AMPC EN CÉLULAS DE LEYDIG MA-10: MODULACIÓN POR LA FOSFATASA MKP-1

MORI SEQUEIROS GARCÍA MM; GOROSTIZAGA AB; ACQUIER AB; GONZALEZ-CALVAR S; MENDEZ CF; PAZ C

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIX REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

MKP-1 es una MAPK fosfatasa que desfosforila a ERK1/2 y a otros miembros de la familia de MAPK. En células de Leydig MA-10, la activación del receptor de LH induce el aumento de MKP-1 por mecanismos transcripcionales y post-traduccionales. El incremento de MKP-1 reduce el efecto de hCG/AMPc sobre la expresión de StAR y la esteroidogénesis. Nur77 es un factor necesario para la transcripción de StAR. Aquí analizamos el rol de ERK1/2 en la regulación de la expresión de Nur77 en células MA-10 y el impacto de las modificaciones post-traduccionales de MKP-1 en dicha regulación. Mediante RT-PCR en tiempo real determinamos que los niveles del ARNm de Nur77 aumentan 20 veces respecto al control (C) a los 30 min de estimulación con 8BrAMPc 0,5 mM (E) (C=1,1 ± 0,1; E=19 ± 3,3, p>120 min vs. 120 min), mientras que flag-MKP- 1-S359A-S364A tiene una vida media menor (45 min). Esto sugiere que la fosforilación en los sitios S359 y S364 promueve la estabilidad de MKP-1, mientras que la fosforilación en S296 y S323 promueve su degradación. En línea con estos resultados la expresión de flag-MKP-1-S296A-S323A redujo el efecto del AMPc sobre Nur77, mientras que la forma inestable flag-MKP-1- S359A-S364A no tuvo efecto. Se concluye que la inducción de Nur77 requiere la participación de ERK1/2 y que la estabilidad de MKP-1 es controlada por fosforilación en múltiples sitios lo cual impacta en la inducción de Nur77 por AMPc.