INVESTIGADORES
MORI SEQUEIROS GARCIA Maria De Las Mercedes
congresos y reuniones científicas
Título:
LA HORMONA ACTH PROMUEVE LA INTERACCIÓN ENTRE PAXILINA Y PTP-PEST, UNA TIROSINA FOSFATASA REGULADA POR FOSFORILACIÓN POR PKA
Autor/es:
GOROSTIZAGA AB; ACQUIER AB; MORI SEQUEIROS GARCÍA MM; MENDEZ CF; PAZ C
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires
Reunión:
Congreso; LIX REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
Hemos descripto que ACTH incrementa la actividad de proteí-
na tirosina fosfatasas (PTPs) en el citosol de zona fasciculata (ZF)
de adrenal de rata y que promueve la activación de una PTP de
115 kDa que identificamos como PTP-PEST. Además demostramos
que ACTH promueve la fosforilación de PTP-PEST mediada
por PKA y su consecuente activación. Se conoce además que en
células adrenocorticales de la línea Y1 la estimulación con ACTH
u 8Br-AMPc produce un cambio en la morfología celular conocido
como rounding-up, que está asociado a la desfosforilación en
tirosina de paxilina, una proteína de citoesqueleto. Dado que
paxilina es sustrato de PTP-PEST en varios sistemas, nuestro
objetivo fue analizar la posible interacción entre paxilina y esa
fosfatasa en ZF de adrenal de rata y en células Y1. Con este fin
se realizó la inmunoprecipitación de paxilina con un anticuerpo
específico a partir de las proteínas citosólicas de ZF de adrenales
de ratas, controles o tratadas con ACTH durante 15 minutos. Los
inmunoprecipitados (IP) se analizaron por SDS-PAGE en geles
de actividad de tirosina fosfatasa. En las muestras provenientes
de ratas tratadas con ACTH, se detectó una banda de actividad
correspondiente a una proteína de 115 kDA que no se detectó
en las muestras provenientes de ratas controles. El análisis por
Western blot de otra alícuota de los IP mostró niveles similares
de paxilina en las muestras de ratas controles y estimuladas.
Por microscopía confocal, utilizando anticuerpos anti-paxilina y
anti PTP-PEST, se observó que en células Y1 la estimulación
promueve la colocalización de estas dos proteínas, además del
cambio en la morfología. Concluimos que ACTH promueve la
interacción de PTP-PEST con paxilina, lo cual sugiere que esa
fosfatasa contribuye ?al menos en parte? en la desfosforilación de
paxilina. PTP-PEST podría participar en la dinámica mitocondrial
inducida por hormonas esteroidogénicas y en la regulación de la
síntesis de esteroides.