Regulación post-traduccional dependiente de AMPc de la MAP QUINASA FOSFATASA-1 (MKP1) en células de Leydig.-

BRION LAURA; MALOBERTI PAULA; SUAREZ GUADALUPE; GOROSTIZAGA ALEJANDRA; CORNEJO MACIEL FABIANA; PODESTA ERNESTO JORGE; PAZ CRISTINA

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LII Reunión Anual de la SAIC; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En células adrenocorticales y de Leydig el control hormonal de la esteroidogénesis y de la proliferación celular ocurre mediante un mecanismo que incluye la actividad de PKA y de MAP quinasas, particularmente ERK1/2. Previamente  demostramos que  en este tipo de células la MAP quinasa fosfatasa 1 (MKP-1), una enzima que defosforila  específicamente a los miembros de la familia de las MAP quinasas, se induce a nivel transcripcional por un mecanismo dependiente de PKA. Con el fin de conocer si la regulacion de MKP-1 en células de Leydig de la línea MA-10 incluye también mecanismos prost traduccionales, se emplearon células transfectadas transitoriamente con el ADNc correspondiente a MKP-1 para expresar constitutivamente esta proteína y células transfectadas con el vector vacíio como control. Mediante Western blot observamos que en las células  que sobre-expresan MKP1, la incubación con 8Br-AMPc (0,75mM, 0-180 min) incrementa los niveles de esta proteína en una magnitud muy superior (20-30 veces) a la registrada en las células transfectadas con el plásmido vació (expresión endógena). El efecto del AMPc sobre MKP-1 se reduce por inhibición de la activación de ERK (PD98059). La incubación de las células con un inhibidor del proteosoma MG1342, aumenta la actividad  de fosfatasas determinada usando [32P] poli-Glutámico-Tirosina como sustrato (control= 515 ±50,  MG=933 ±82 cpm/ min/ug proteína, p