Participación de acil-CoA tioesterasas y araquidonoil-CoA sintetasas en la regulación de la esteroidogénesis y liberación de ácido araquidónico.

MALOBERTI PAULA; MELE PABLO; BEY PAULA; CANO FLORENCIA; CASTILLA ROCÍO; CORNEJO MACIEL FABIANA; PODESTA ERNESTO J

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2001

El ácido araquidónico (AA) juega un rol obligatorio en la regulación de la esteroidogénesis. Estas conclusiones están basadas en que inhibidores de la PLA2 inhiben este proceso. Previamente caracterizamos y clonamos una acil-CoA tioesterasa involucrada en la regulación de la esteroidogénesis capaz de liberar AA. El objetivo del presente trabajo es demostrar el rol de araquidonoil-CoA sintetasas y acil-CoA tioesterasas en la regulación de la esteroidogénesis. Los compuestos ácido nordihidroguayarético (NDGA) (50uM), bromuro de p-bromofenacilo (100uM) y araquidonoil-trifluorometil-cetona (100uM), inhibidores de la PLA2, reducen un 100, 75 y 65% la actividad in vitro de la tioesterasa respectivamente. Triacsin C, inhibidor de la enzima araquidonoil-CoA sintetasa, inhibe la esteroidogénesis. La incubación de células Y1 en presencia de dosis submáximas de Triacsin C (0,5uM) y NDGA (5uM) produce un efecto sinérgico de un 93% de inhibición en la síntesis de esteroides, mientras que las mismas dosis individualmente producen una inhibición del 21% y 69% respectivamente. La localización subcelular de acil-CoA tioesterasas (citosólica y mitocondrial) fue estudiada a través de la expresión en células esteroidogénicas de las enzimas fusionadas a la proteína GFP y Western blot, observándose una distribución diferencial de acuerdo con la proteína utilizada. La acción concertada de acil-CoA tioesterasa y sintetasa constituiría un mecanismo de liberación de AA y su compartimental