Regulación transcripcional de la acil-CoA sintetasa 4 (ACSL4) por CREB y SP1 en células esteroidogénicas

COOKE MARIANA; ORLANDO ULISES; CORNEJO MACIEL FABIANA; MALOBERTI PAULA

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2011

REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL DE LA ACIL-COA-SINTETASA-4 (ACSL4) POR CREB Y SP1 EN CÉLULAS ESTEROIDOGÉNICAS. Los niveles intracelulares de ácido araquidónico (AA) son regulados en respuesta a diferentes agonistas fisiológicos en diferentes tejidos. Hemos demostrado previamente la existencia de un nuevo mecanismo de liberación compatimentalizada de AA en el que participa la enzima ACSL4 como marcapaso. ACSL4 está involucrada también en la formación de dendritas en sistema nervioso, en la fusión de membranas y en la producción de eicosanoides en células tumorales lo que favorece la agresividad tumoral. Los niveles de expresión de ACSL4 son regulados hormonalmente a través del AMPc en células esteroidogénicas. Previamente clonamos y caracterizamos a través de deleciones unidireccionales la secuencia mínima del promotor de ACSL4 que es regulada por AMPc. Esta secuencia mínima, 150 pb río arriba del inicio de la transcripción, contiene sitios consenso para los factores de transcripción SP1 y CREB, entre otros y no posee una secuencia TATA box. El objetivo de este trabajo fue demostrar el rol de los factores CREB y SP1 en la regulación transcripcional de ACSL4. A través de ensayos de EMSA comprobamos que estos sitios consenso unen específicamente factores de transcripción. La mutación sitio dirigida de los sitios consenso tanto de SP1 como CREB a través del método de megaprimers produce una disminución significativa de la actividad tanto basal (p