En el testículo de ratas con orquitis autoinmune experimental la isoforma inducible de la óxido nítrico sintasa es modulada selectivamente y genera un aumento del contenido de óxido nítrico

JARAZO DIETRICH S, JACOBO, P PÉREZ C V, MAZZOCCHI L, LUSTIG L, THEAS M S.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El testículo a pesar de ser un órgano inmunoprivilegiado, puede desarrollar cuadros de inflamación que cursan con infertilidad. Para estudiar los mecanismos involucrados en el daño testicular, desarrollamos un modelo de inflamación crónica, la orquitis autoinmune experimental (OAE), caracterizado por el infiltrado de linfocitos y macrófagos y la apoptosis de las células germinales. La oxido nítrico sintasa (ONS) posee un importante papel en la modulación de la apoptosis de las células germinales en el testículo normal y patológico, por lo que estamos interesados en estudiar su papel en el desarrollo de la orquitis. Previamente demostramos por inmunohistoquímica, un aumento de la expresión de las isoformas constitutivas de la ONS (neuronal y endotelial, Ca2+ dependientes) y de la inducible (i, Ca2+ independiente) en el intersticio y en las células del túbulo. El objetivo de este trabajo fue caracterizar el sistema ONS-ON en el testículo de ratas con OAE. La OAE fue inducida por inmunización con antígenos espermáticos y adyuvantes (grupo experimental, E); las ratas control (C) fueron inyectadas sólo con adyuvantes. El contenido de ON, evaluado por el método colorimétrico de Griess, fue mayor en el grupo E vs C (media±DE μM/mg proteína C: 0.30±0.29, E: 0.90±0.53, p<0.01). La actividad de la ONS fue evaluada mediante la conversión de L-arginina [H3] a L-citrulina [H3] en presencia de Ca2+para determinar la actividad total (T) y en ausencia de Ca2+ para determinar la de la ONSi. La actividad en ambas condiciones fue mayor en el grupo E vs C y se revirtió en presencia del inhibidor L-NAME (media±DE fmol/min/mg proteína, ONST: C: 0.47±0.36, E: 2.65±1.18 p<0.001, E+L-NAME (2mM): 0.59±0.28; ONSi: C: 0.92±0.35, E: 1.98±1.00 p<0.05). Por Western blot observamos un aumento de la expresión de la ONSi en el grupo E vs C. En conclusión, demostramos que en la OAE el aumento de la producción de ON se debe a una modulación selectiva de la actividad y de la expresión de la ONSi.