INV SUPERIOR JUBILADO
SEILICOVICH Adriana
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterizacion de los receptores de estrogénicos asociados a membrana en celulas adenohipofisarias
Autor/es:
S. ZARATE; G. JAITA; J. FERRARIS; G. EIJO; M. L. MAGRI; D. PISERA; A. SEILICOVICH
Reunión:
Congreso; LVI Reunion de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2011
Resumen:
En la adenohipofisis, los estrogenos regulan diversas funciones celulares mediante mecanismos clasicos y no clasicos. Estos ultimos involucran la activacion de receptores de estrogenos (ERs) asociados a la membrana plasmatica.Previamente hemos demostrado que tanto el estradiol (E2) como conjugados entre E2 y macromoleculas, los cuales no difunden hacia el interior de la celula, inducen una rapida respuesta apoptotica en celulas adenohipofisarias, lactotropos y somatotropos. El antagonista de ERs clasicos, ICI 182,780,revierte completamente este efecto, indicando que la activacion de estos receptores asociados a la membrana plasmatica estaria involucrada en el efecto proapoptotico del E2. En el presente trabajo, determinamos las variante del receptor de estrogenos alfa (ER alfa asociadas a la membrana plasmatica de celulas adenohipofisarias. A partir de cultivos primarios de celulas adenohipofisarias provenientes de ratas hembras Wistar adultas, obtuvimos extractos enriquecidos en proteinas de membrana por biotinilacion de la superficie celular, los cuales fueron analizados por Western Blot. Utilizando un anticuerpo dirigido hacia el dominio carboxilo-terminal del ERalfa, identificamos la presencia de tres isoformas del receptor, una de 67 kDa (mERá 67), otra de 39 kDa (mERá 39) y otra de 21-22 kDa (mERá 21). Tambien evaluamos si el E2 regula esta asociacion entre el receptor y la membrana de una forma dependiente del tiempo. Incubamos cultivos primarios de celulas adenohipofisarias provenientes de ratas ovariectomizadas con E2 1 nM durante 5-120 min y realizamos el mismo analisis de biotinilacion de superficie celular y Western Blot. El E2 aumento la expresion de mERá 67 en forma transitoria, observandose niveles maximos a los 30 min de incubacion (ANOVA de una via, p
