) PARTICIPACIÓN DE LA TIROSINA FOSFATASA SHP2 EN LA INDUCCIÓN DE ACSL4 Y ACTIVACIÓN DEL TRANSPORTE DE COLESTEROL ESTIMULADOS POR AMPC EN CÉLULAS DE LEYDIG MA-10

. COOKE M.1; DI CÓNSOLI H.2; SCAZZINA B.3; MALOBERTI P.4; PODESTÁ E.5; CORNEJO MACIEL F

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos que la activación de tirosina fosfatasas (TPs) es necesaria para la regulación de la esteroidogénesis estimulada por ACTH y LH/CG en células adrenocorticales y de Leydig testiculares. La defosforilación de proteínas en residuos de tirosina se requiere luego de la producción de AMPc para la inducción de una proteína clave de la cascada de transducción de la señal hormonal: la acil-CoA sintetasa 4 (ACSL4). Esta enzima junto con una acil-CoA tioesterasa mitocondrial determinan la producción compartimentalizada del ácido araquidónico necesario para la inducción de otra proteína regulatoria denominada StAR (steroidogenic acute regulatory protein) de localización mitocondrial y transportadora de colesterol. El objetivo del presente trabajo fue identificar la TP involucrada en este mecanismo. Para ello se realizó la sobrexpresión de la TP SHP2 o PTP1D en células de Leydig de la línea MA-10, utilizada ampliamente como modelo esteroidogénico. Resultados previos obtenidos por medición de actividad en geles sugerían que la enzima SHP2 podría ser una de las TPs involucrada en este mecanismo. La sobrexpresión de SHP2 produjo un incremento significativo en la producción de progesterona (P4) estimulada por concentraciones submáximas (0,5 mM) de 8Br-AMPc (concentración P4 en el medio de cultivo, en ng/ml: pRC/CMV = 53 ± 3 vs. SHP2- pRC/CMV 78 ± 16; p < 0,01). Este efecto no se produce cuando en las células se sobrexpresa una forma catalíticamente inactiva de la enzima. La sobrexpresión de SHP2 también incrementó los niveles de ACSL4 analizadas por Western Blot. Estos resultados nos permiten sugerir que la SHP2 es al menos una de las TPs involucradas en la regulación por acción hormonal de los niveles de ACSL4 y de la esteroidogénesis y confirma la necesidad de defosforilación de sustratos en tirosina mediada por PKA como paso obligatorio en la regulación del transporte de colesterol.