LA ACIL-COA SINTETASA 4 (ACS4) Y LA ACIL-COA

J G MILD 1, M J PÉREZ 2, A LAGO 1, J M PASQUINI 2, E F SOTO 3, P. MALOBERTI, E J PODESTÁ

Mar del Plata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El mecanismo molecular de la neuroesteroidogénesis a partir del colesterol no ha sido completamente descripto. Trabajos previos demostraron que cultivos primarios de astrocitos de cerebelo expresan las enzimas esteroidogénicas P450scc y 3â-HSD y la proteína StAR (Steroidogenic Acute Regulatory Protein). Hemos descripto previamente, en células esteroidogénicas, una nueva vía de liberación de ácido araquidónico intramitocondrial en la cual participan ACS4 y Acot2. El ácido araquidónico y sus productos lipoxigenados intervienen en la regulación de StAR y la esteroidogénesis. El objetivo de este trabajo es estudiar la expresión y regulación de esta vía en células neuroeste-roidogénicas. Se realizaron cultivos primarios de astrocitos de cerebelo de rata RESÚMENES DE LAS COMUNICACIONES 141 postnatal P2. Se observó por inmunocitoquímica que ACS4 y Acot2 se expresan en astrocitos, utilizando como marcador del tipo celular la proteína ácida fibrilar glial. Los astrocitos fueron incubados con 8Br-AMPc (1mM) y la expresión de ACS4 y Acot 2 se analizó por Western blot y RT-PCR semicuantitativa. Se observó un incremento en los niveles de la proteína ACS4 a las 6 horas de estimulación (6,73±0,22, 12,38±0,33, control vs 8Br-AMPc, unidades arbitrarias p<0,05). Por RT-PCR se observó un aumento del mensajero de ACS4 de un 50 % a las 6 horas y de un 200 % a las 12 horas respectivamente respecto del control. Se observó por Western blot un aumento en la expresión de Acot2 a las 6 horas de estimulación (200 % respecto del control). Por otro lado, se observó que la incubación con 17-ß estradiol (10-9 M, durante 24 horas) regula la expresión de ambas enzimas. En concordancia con estudios que indican que los estrógenos estimulan la neuroesteroi-dogénesis y que el AMPc induce la expresión de StAR y la síntesis de esteroides en astrocitos, aquí demostramos que estos agentes también inducen la expresión de las enzimas generadoras de ácido araquidónico intramitocondrial, necesario para la regulación de StAR y la esteroidogénesis.