Bax modula la via apoptótica mitocondrial en las células germinales en la orquitis autoinmune?

THEAS M.S.; RIVAL C.; GUAZZONE V.A.; JACOBO P.; LUSTIG L.

Mar del Plata

Congreso; XLX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigaci¨®n Cl¨ªnica; 2005

SAIC

Bax ¦Á modula la vía apoptótica mitocondrial en las cé¦lulas germinales (CG) en la orquitis autoinmune experimental (OAE) Susana Theas, Claudia Rival, Vanesa Guazzone, Patricia Jacobo, Livia Lustig. Centro de Investigaciones en Reproducci¨®n. Facultad de Medicina. UBA. En la OAE previamente demostramos que las vías externa y mitocondrial están involucradas la apoptosis de las CG mediante la activaci¨®n de las caspasas 8, 9 y la liberación del citocromo c. Bax¦Â (24kDa) y Bax¦Á (21kDa) son las isoformas citosólica y traslocable a membrana respectivamente, de la proteína proapoptótica Bax. En la OAE demostramos expresión de Bax en las CG (inmunohistoquímica) y un aumento del contenido de Bax¦Â (Western Blot, Wb). Dado que tambi¨¦n detectamos expresión de Bax¦Á (Wb) nos propusimos estudiar el rol de esta proteína en la regulación de la apoptosis. Ratas macho fueron inmunizadas con ant¨ªgenos esperm¨¢ticos y adyuvantes (grupo OAE) o s¨®lo con adyuvantes (grupo control, C). La expresi¨®n de Bax¦Á fue estudiada por Wb en homogenado de test¨ªculo total (HTT) y de las fracciones citos¨®lica (FC), mitocondrial (FM) y de ret¨ªculo endoplasm¨¢tico (FRE). El contenido del citocromo c fue determinado por Wb en la FC y en la FM. El contenido de Bax¦Á en el HTT fue similar en las ratas C y con OAE (C:0.239¡À0.015, OAE:0.290¡À0.112 unidades arbitrarias de DO). Sin embargo, el contenido de Bax¦Á disminuy¨® en la FC (C:1.002¡À0.002, OAE:0.780¡À0.028 veces de incremento, p<0.01) y aument¨® en la FM (C:1.000¡À0.001, OAE:1.787¡À0.499) y en la FRE (C:0.966¡À0.004, OAE:1.589¡À0.084 p<0.01) de ratas con OAE vs C. El contenido del citocromo c disminuy¨® en la FM (C:1.000¡À0.001, OAE:0.482¡À0.151 p<0.05) y aument¨® en la FC (C:1.066¡À0.066, OAE:3.269¡À1.152). La traslocación de Bax¦Á a la mitocondria y la liberación del citocromo c al citoplasma sugieren que Bax¦Á modula la vía apoptótica mitocondrial en la OAE. El aumento de Bax¦Á en el RE indica que esta proteína podría estar tambien involucrada en la apoptosis mediada por esta organela.