CAMBIOS MOLECULARES A NIVEL DE LA RESPUESTA INMUNE LOCAL ANTE LA INFECCIÓN EXPERIMENTAL POR HERPESVIRUS EQUINO 1 EN EL MODELO RATÓN BALB/C.

BRAVI, ME; SGUAZZA, HG; SCROCHI, MR; FUENTEALBA, NA; NISHIDA, F; ORSINI DELGADO, M LUCÍA; SMALDINI PAOLA L; DOCENA GUILLERMO H; BARBEITO, CG ; MUGLIA, CECILIA I; ZANUZZI, CAROLINA N; GALOSI, CM

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015

El Herpesvirus equino 1 (EHV-1) es unpatógeno endémico que genera pérdidas económicas en la industria hípica. Produce signosrespiratorios, nerviosos,  abortos ysíndrome neonatal. Si bien aun no han sido dilucidados todos los aspectos sobre la patogenia delaborto, esta presentación requiere del establecimiento de una fase virémica quepermita la llegada del virus al útero. Como se ha demostrado en otros procesosinfecciosos, nuestra hipótesis es que lainfección modifica el perfil de citoquinas uterinas hacia un predominio deaquellas que pueden determinar la interrupción de la preñez. Lamayoría de las investigaciones relacionadas con el aborto por EHV-1 han sidorealizadas utilizando el modelo murino BALB/c, que permiteobtener datos completos, comparables y extrapolables al equino.El objetivo de este trabajo fue analizar cambios a nivel dela respuesta inmune local en úteros al día 3 posinfección (tiempo seleccionadosegún ensayos previos en los que hemos estandarizado el momento óptimo para losanálisis histopatológicos, inmunohistoquímicos y moleculares) que podríanintervenir  en la interrupción de lagestación en hembras desafiadas con el virus por vía intranasal. Todos los estudiosdel presente trabajo se realizaron comparativamente con ratonas controlesinoculadas con medio de cultivo. Secuantificó además el ARNm, por PCR en tiempo real (qPCR), de los genes que codifican para IL-10, TNF e IFN-γ utilizando primers específicos/SYBR green. Por  ELISA (IFN-γ e IL13) y porCitometría de Flujo (CBA, Becton Dickinson)(TNF) se midieron los niveles de expresión de las proteínas producidas. Para larealización de estas últimas técnicas las muestras se homogenizaron y setrataron con inhibidor de proteasas. En la necropsia seobservó que el número de unidades fetoplacentarias en los animales infectadosfue menor que la media para la cepa utilizada pudiendo indicar el suceso delaborto. La cuantificación relativa por qPCR expresada como 2-doble deltaCt(cantidades en número de veces con respecto al calibrador de βactina) indicódiferencias del grupo infectado respecto al control para los genesamplificados. La diferencia de expresión de las citoquinas, analizada por laprueba de T de Student indicó diferencias significativas. Se concluye que hayun aumento de TNF que indica un fuerte incremento de respuesta Th1 y aumento de IFN-γ que concuerda con una infección viral. Además el aumento moderado de ILde respuesta Th2 y tolerogénica (IL10), podría atribuirse a una respuesta pararestaurar el balance homeostático ante la infección.