Diseño de una plataforma de vacunas mucosales a base de nanotecnología

CHAVERO, CAMILA; DOCENA GUILLERMO H; SMALDINI PAOLA LORENA

Encuentro; Encuentro de Becaries de Posgrado de la UNLP (EBEC 2022); 2022

Las alergias alimentarias (AA) son patologías inflamatorias en las que elsistema inmune se activa en forma aberrante frente a sustancias inocuas(alérgenos) y se postula que se debe a un desbalance entre poblaciones delinfocitos T efectoras (Th2) y regulatorias. Hasta elmomento, el únicotratamiento válido y aprobado para la mayoría de las AA es la restriccióndietaria,pero claramenteesta opción sólo elimina el estímulo inflamatorio y no corrige el defectoinmunológico de base. La inmunoterapia sublingual (ITSL) constituye unavariante altamente promisoria como tratamiento correctivo de las AA. Laprincipal ventaja es que requiere bajas dosis de alergeno para inducirtolerancia, y esto reduce marcadamente los efectos adversos en comparación conla IT Oral, sin embargo, hasta el momento se ha demostrado que resulta menoseficiente. El empleo de agonistas de TLR capaces de inducir una inmunidadTh1-dependiente ha permitido revertir los mecanismos Th2-dependientes quegobiernan las alergias IgE-mediadas. Sobre la base de estos hallazgosplanteamos que la administración mucosal de un adyuvante pro-Th1, como son lasNanopartículas (Np) serán de utilidad para desviar la respuesta alérgica,sentando las bases experimentales para el desarrollo de una inmunointervenciónbasada en inmunomodulación.Lacaracterización de las Np como adyuvante se realizará mediante ensayos in vitro, utilizando distintas líneas celularestanto murinas (J774 o RAW) como humanas (THP-1), las cuales se estimularán en presencia de lasnanopartículas y se caracterizará la respuesta mediante la medición decitoquinas secretadas por ELISA de captura(IL-1β, TNF-α, IL-6, etc.), oactivación mediante citometría de flujo (MHCclase II, CD80, CD86, etc). Paraestos ensayos se probarán Np de carga positiva y negativa a diferentes dosis. Seseleccionará la Np que presente una buena activación a dosis bajas, para luegoemplearla como como adyuvante inmunomodulador en un modelo de alergia aproteínas de leche vaca (PLV) invivo.Para ello, se inducirá una respuesta Th2 especifica a PLV en ratones Balb/c mediantela administración intragástrica de PLV junto con toxina colérica con unafrecuencia semanal. Luego se realizará un del desafío oral con PLV (alergeno)para demostrar que los ratones fueron sensibilizados. Una vez inducida laalergia, se comenzará con la fase de desensibilización (tratamiento) con laformulación/es formulaciones vacunal/es elegida/s mediante la administraciónsublingualMediantela caracterización invitro,se demostró que las diferentes Nps empleadas son capaces de activar el sistemainmune, posiblemente a través de la vía del inflamasoma, ya que se encontraronniveles aumentados de IL1β en sobrenadante decultivo (p<0,05), los cuales revierten en presencia de inhibidores de la vía.Hasta el momento, podemos seleccionar una Np positiva, la cual induce unarobusta respuesta a dosis bajas. Este resultado es muy promisorio para suempleo como adyuvante mucosal donde se requiere de pequeñas cantidades aadministrar de la formulación. @font-face{font-family:"Cambria Math";panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:roman;mso-font-pitch:variable;mso-font-signature:-536870145 1107305727 0 0 415 0;}@font-face{font-family:Calibri;panose-1:2 15 5 2 2 2 4 3 2 4;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:swiss;mso-font-pitch:variable;mso-font-signature:-536859905 -1073732485 9 0 511 0;}@font-face{font-family:ArialNarrow;panose-1:2 11 6 6 2 2 2 3 2 4;mso-font-alt:Arial;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:roman;mso-font-pitch:auto;mso-font-signature:0 0 0 0 0 0;}@font-face{font-family:ArialNarrow-Bold;panose-1:2 11 7 6 2 2 2 3 2 4;mso-font-alt:Arial;mso-font-charset:0;mso-generic-font-family:roman;mso-font-pitch:auto;mso-font-signature:0 0 0 0 0 0;}p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal{mso-style-unhide:no;mso-style-qformat:yes;mso-style-parent:"";margin-top:0in;margin-right:0in;margin-bottom:8.0pt;margin-left:0in;line-height:107%;mso-pagination:widow-orphan;font-size:11.0pt;font-family:"Calibri",sans-serif;mso-ascii-font-family:Calibri;mso-ascii-theme-font:minor-latin;mso-fareast-font-family:Calibri;mso-fareast-theme-font:minor-latin;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin;mso-bidi-font-family:"Times New Roman";mso-bidi-theme-font:minor-bidi;mso-ansi-language:ES-AR;}span.MsoCommentReference{mso-style-noshow:yes;mso-style-priority:99;mso-ansi-font-size:8.0pt;mso-bidi-font-size:8.0pt;}span.fontstyle01{mso-style-name:fontstyle01;mso-style-unhide:no;mso-ansi-font-size:11.0pt;mso-bidi-font-size:11.0pt;font-family:"ArialNarrow",serif;mso-ascii-font-family:ArialNarrow;mso-hansi-font-family:ArialNarrow;color:black;font-weight:normal;font-style:normal;}span.fontstyle21{mso-style-name:fontstyle21;mso-style-unhide:no;mso-ansi-font-size:11.0pt;mso-bidi-font-size:11.0pt;font-family:"ArialNarrow-Bold",serif;mso-ascii-font-family:ArialNarrow-Bold;mso-hansi-font-family:ArialNarrow-Bold;color:black;font-weight:bold;font-style:normal;}.MsoChpDefault{mso-style-type:export-only;mso-default-props:yes;font-size:11.0pt;mso-ansi-font-size:11.0pt;mso-bidi-font-size:11.0pt;font-family:"Calibri",sans-serif;mso-ascii-font-family:Calibri;mso-ascii-theme-font:minor-latin;mso-fareast-font-family:Calibri;mso-fareast-theme-font:minor-latin;mso-hansi-font-family:Calibri;mso-hansi-theme-font:minor-latin;mso-bidi-font-family:"Times New Roman";mso-bidi-theme-font:minor-bidi;mso-ansi-language:ES-AR;}.MsoPapDefault{mso-style-type:export-only;margin-bottom:8.0pt;line-height:107%;}div.WordSection1{page:WordSection1;}