INVESTIGADORES
FOSSATI Carlos Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
EFECTOS MODULATORIOS DE LAS VESÍCULAS DE MEMBRANA EXTERNA DE BRUCELLA DURANTE LA INFECCIÓN DE MONOCITOS
Autor/es:
POLLAK C; DELPINO MV; FOSSATI, CA; BALDI PC,
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LX Reunión anual de Sociedad Argentina de Inmunología; 2012
Institución organizadora:
SAI-SAIC
Resumen:
Diversas
bacterias Gram negativas liberan vesículas de membrana externa (VME) que pueden
contener factores de virulencia y
modular la respuesta inmunológica a favor del patógeno. Previamente mostramos
que la preincubación con VME de Brucella inhibe la producción de TNF-α por
monocitos humanos (THP-1) en respuesta a agonistas de TLRs, pero aumenta la
expresión de ICAM-1. Por ello decidimos
evaluar si la preincubación de THP-1 con
VME modifica su adhesión a endotelio (HMEC-1). Las VME fueron obtenidas por concentración del medio
de cultivo de B. abortus . Células THP-1
fueron preincubadas o no con VME, luego marcadas
con calceína y colocadas sobre monocapas de HMEC-1 previamente activadas con TNF-α. Las células
no adheridas fueron removidas y se midió
la fluorescencia. Las VME produjeron un
aumento dosis dependiente (p<0.001 para 10 μg/ml) en la adherencia de
los monocitos. También evaluamos si la incubación de células THP-1 con VME antes o durante la
infección con B. abortus aumenta la
adhesión e invasión de Brucella. La
preincubación con VME (10 μg/ml) produjo
un aumento significativo de bacterias adheridas (9.5 veces) e internalizadas
(10.8 veces) en los monocitos respecto
de las células no pretratadas con VME. La coincubación, aumentó 17.8 veces la adhesión y 11.3 veces
la invasión. Para evaluar el efecto de
las VME sobre la producción de citoquinas
en la infección, células THP-1 fueron incubadas o no con VME 4 h antes de la infección con B. abortus y se midieron las citoquinas en los sobrenadantes de cultivo a las 24 hs.
La preincubación con 1 o 10 μg/ml de VME
disminuyó significativamente la secreción
de TNF-α (76% y 83%) y de IL-8 (13% y 68%). Los resultados sugieren que las VME liberadas por Brucella ejercen efectos que promueven la adhesión e internalización de la
bacteria a monocitos, a la vez que regulan negativamente su respuesta inmune innata frente a la infección. Esto podría
favorecer la persistencia de Brucella
dentro de las células hospedadoras.