INVESTIGADORES
FOSSATI Carlos Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
EFECTOS MODULATORIOS DE LAS VESÍCULAS DE MEMBRANA EXTERNA DE BRUCELLA DURANTE LA INFECCIÓN DE MONOCITOS
Autor/es:
POLLAK C; DELPINO MV; FOSSATI, CA; BALDI PC,
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LX Reunión anual de Sociedad Argentina de Inmunología; 2012
Institución organizadora:
SAI-SAIC
Resumen:
Diversas bacterias Gram negativas liberan vesículas de membrana externa (VME) que pueden contener factores de virulencia  y modular la respuesta inmunológica a favor del patógeno. Previamente mostramos que la preincubación con VME de Brucella inhibe la producción de TNF-α por monocitos humanos (THP-1) en respuesta a agonistas de TLRs, pero aumenta la expresión de  ICAM-1. Por ello decidimos evaluar si la preincubación de THP-1  con VME modifica su adhesión a endotelio (HMEC-1). Las VME  fueron obtenidas por concentración del medio de cultivo de  B. abortus . Células THP-1 fueron preincubadas o no con VME, luego  marcadas con calceína y colocadas sobre monocapas de HMEC-1  previamente activadas con TNF-α. Las células no adheridas fueron  removidas y se midió la fluorescencia. Las VME produjeron un  aumento dosis dependiente (p<0.001 para 10 μg/ml) en la adherencia de los monocitos. También evaluamos si la incubación de  células THP-1 con VME antes o durante la infección con  B. abortus aumenta la adhesión e invasión de  Brucella. La preincubación con  VME (10 μg/ml) produjo un aumento significativo de bacterias adheridas (9.5 veces) e internalizadas (10.8 veces) en los monocitos  respecto de las células no pretratadas con VME. La coincubación,  aumentó 17.8 veces la adhesión y 11.3 veces la invasión. Para  evaluar el efecto de las VME sobre la producción de citoquinas  en la infección, células THP-1 fueron incubadas o no con VME 4  h antes de la infección con  B. abortus y se midieron las citoquinas  en los sobrenadantes de cultivo a las 24 hs. La preincubación con  1 o 10 μg/ml de VME disminuyó significativamente la secreción  de TNF-α (76% y 83%) y de IL-8 (13% y 68%). Los resultados  sugieren que las VME liberadas por  Brucella ejercen efectos que  promueven la adhesión e internalización de la bacteria a monocitos, a la vez que regulan negativamente su respuesta inmune  innata frente a la infección. Esto podría favorecer la persistencia  de  Brucella  dentro de las células hospedadoras.