GENE EXPRESSION MISREGULATION IN DNA REPAIR DEFICIENT CELLS

ADRIÁN CAMBINDO BOTTO; JUAN C. MUÑOZ; LUCIANA GIONO; NICOLÁS NIETO MORENO; ALBERTO R. KORNBLIHTT; MANUEL J. MUÑOZ

Workshop; Biología Celular y Molecular del ARN; 2018

El daño al ADN causado naturalmente por la exposición a la luz ultravioleta en células de la piel desencadena no sólo mecanismos de reparación de lesiones sino también una respuesta de expresión génica global que, en última instancia, modula las funciones celulares. Recientemente demostramos que la reparación del ADN, a través del sistema de reparación por escisión de nucleótidos (NER, por sus siglas en inglés), genera intermediarios de ADN simple cadena (ADNsc) los cuales activan a la quinasa ATR (Ataxia telangiectasia mutated and RAD3 related) . La activación de ATR desencadena la hiperfosforilación de la subunidad mayor de la RNAPII afectando la expresión génica a nivel cuantitativo y cualitativo (modificando la proporción de las isoformas de splicing alternativo). Además, utilizando la tecnología CRISPR-Cas9, encontramos que la delesión de XPE, un factor de reconocimiento de la lesión, disminuye parcialmente el efecto del UV en el AS, demostrando el crosstalk entre la reparación y la expresión génica (Muñoz, 2017).Para estudiar si el proceso de reparación actúa como modulador de la expresión génica utilizamos diversos siRNAs para disminuir la expresión de diferentes factores de reparación con el fin de evaluar tanto reparación cómo expresión génica en respuesta al UV.Los factores NER pueden ser divididos en dos grupos, aquellos a cargo del reconocimiento de la lesión (XPE y XPC) y aquellos a cargo de la reparación en sí (XPA, XPB, XPD, XPF, XPG): encontramos que el impedimento en el reconocimiento de la lesión o de la reparación tienen diferentes consecuencias a nivel de la expresión génica. Postulamos que un menor reconocimiento de la lesión por parte del sistema NER expone poco ADNsc mientras que lo contrario es cierto cuando la reparación en sí esta afectada, sobreactivando en consecuencia a ATR. Si bien está claro que todos los pacientes XP tienen un mayor riesgo de desarrollar cáncer de piel, existen algunas otras características clínicas que son específicas de qué factor se encuentre mutado. Por lo tanto proponemos que algunas de las características clínicas de los pacientes XP se deben a defectos en la modulación de la expresión génica desencadenada por la vía de reparación del ADN.