La administración oral de Lactococcus lactis recombinantes que expresan el toxoide epsilon* es capaz de inducir inmunidad específica contra Clostridium perfringens

CARLOS A. PÉREZ; VALENTINA SALZMAN; DIEGO J. COMERCI; DIEGO DE MENDOZA

San Miguel de Tucumán (Tucumán).

Simposio; Simposio Internacional de Biotecnología. Aplicación en Alimentos, Salud y Medio Ambiente. II Simposio Argentino-Italiano de Bacterias Lácticas.; 2004

CERELA Y PROIMI

Clostridium perfringens es una bacteria Gram positiva, anaerobia, productora de toxinas que se encuentra en forma ubicua en el ambiente en forma de esporas.  C. perfringens tipo B produce la toxina e, que causa disentería en vacas y ovejas con una mortalidad que puede llegar al 100%. Dada la rapidez con que se manifiestan los síntomas, el tratamiento se torna ineficaz, resultando la vacunación un aspecto esencial para controlar la enfermedad. Para el diseño de una vacuna capaz de neutralizar los efectos de las toxinas entéricas es aconsejable elegir la vía oral de administración. Esto permite estimular específicamente la respuesta inmune en la mucosa gastrointestinal, vía natural de ingreso del patógeno. Además, las vacunas orales son más fáciles de administrar ya que no requieren personal con alta capacitación. Las  vacunas desarrolladas hasta el momento, basadas en cepas inactivadas, tienen inmunogenicidad variable y su preparación presenta riesgos importantes. Como estrategia alternativa, planteamos en este trabajo el desarrollo de un nuevo tipo de vacuna contra C. perfringens basado en la administración oral de Lactococcus lactis recombinantes que expresan el toxoide e*. Este toxoide, codificado por el gen etx*, posee una sustitución (histidina por prolina en la posición 106) que resulta en la pérdida de su carácter toxigénico  pero conserva su  inmunogenicidad.  El gen etx* se colocó bajo el control de los promotores PnisA y P59. Mediante Western-blot se demostró que las cepas recombinantes sintetizan intracelularmente el toxoide e*  y se seleccionó la cepa con mayor eficiencia de  expresión para posteriores ensayos. Para estudiar el efecto inmungénico de la administración oral de las cepas recombinantes se utilizaron  tres modelos animales. El análisis de los sueros por los métodos de ELISA y Western-blot reveló la presencia de anticuerpos específicos anti-e*. Estos resultados demuestran que la administración oral de una cepa recombinante que expresa e* es capaz inducir inmunidad especifica contra C. perfringens.