Efecto de fribrillas amiloides naturales sobre la memoria y la actividad de NF-kappaB y MAPKs en el cangrejo Chasmagnathus.

FELD M; DIMANT B; CIOTTI MT; RUBERTI F; GALLI C; ROMANO A

Vaquerías, Córdoba

Taller; VI Taller de Neurociencias; 2004

Si bien se ha demostrado que la administración de beta-amiloide (Ab) sintético no fibrilado afecta la memoria en roedores, se desconocía hasta ahora el efecto de la administración de fibrillas naturalmente secretadas por neuronas. En un trabajo reciente comprobamos que la administración pre-entrenamiento de fibrillas de Ab naturalmente secretadas por células granulares de cerebelo de ratón (fsAb), y no el péptido Ab1-40 sintético fibrilado, inducen amnesia sobre la Memoria Contexto-Señal (MCS) del cangrejo Chasmagnathus. En el presente trabajo se continuó el estudio del efecto de fsAb sobre la memoria, así como de su acción sobre la señalización intracelular mediada por MAPKs, involucradas en la consolidación de la MCS. También se analizó la presencia del precursor de Ab (APP) así como del Ab endógeno en Chasmagnathus. La administración de fsAb (50ng/animal) inmediatamente post-entrenamiento resultó amnésica, pero no 24 o 18 hs antes del entrenamiento. En estudios preliminares de western blot con anticuerpos contra la forma fosforilada de ERK/MAPK se observó un aumento en los niveles de activación de esta kinasa en la fracción nuclear, una hora luego de la inyección de fsAb. En otro set de experimentos se demostró la presencia de una proteína homóloga del APP en Chasmagnathus mediante western blots e inmunohistoquímica con anticuerpos dirigidos contra distintas regiones de la misma proteína de ratón. Asimismo se corroboró la existencia de fibrillas de Ab en el cerebro central de este invertebrado por medio de tinciones histológicas con Rojo Congo. Finalmente, se comprobó la existencia de un fragmento de ARNm de Chasmagnathus del mismo tamaño esperado por amplificación con primers específicos para Ab de mamíferos con la técnica de RT-PCR. Estos resultados sugieren que las fsAb modulan la señalización intracelular activando vías tales como las de ERK, y que su efecto amnésico tiene lugar cuando es administrada peri-entrenamiento, descartando la posibilidad de efectos inespecíficos o tóxicos. La presencia de la región de APP que origina Ab, o del Ab mismo, no ha sido descripta previamente en invertebrados. Este trabajo permite suponer que este modelo sería adecuado para estudiar los mecanismos moleculares por los cuales Ab interfiere con la memoria y la interacción del mismo con su precursor como posible mecanismo de acción, así como de las vías de producción del péptido y su complejización en fibrillas.