LA INDUCCIÓN DE SENESCENCIA PODRÍA INVOLUCRAR CAMBIOS EN LA EXPRESIÓN DE COACTIVADORES QUE PARTICIPAN EN EL DESARROLLO TUMORAL

M. RUIZ GRECCO; M.F. RUBIO; P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; C. ALVARADO; S. MICENMACHER; M. COSTAS

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

SAIC

La senescencia celular es un proceso genéticamente controlado que involucra el arresto irreversible del ciclo celular y puede ocurrir por dos mecanismos: acortamiento de telómeros o acumulación de daños genómicos a lo largo del tiempo. En las células senescentes se produce un cambio de la expresión génica acompañado de cambios en la heterocromatinización que pueden favorecer el desarrollo tumoral. RAC3 es un coactivador de receptores nucleares y de NF-kB, que interviene en el remodelado de la cromatina y contribuye al desarrollo tumoral. Se quiso determinar si los niveles de expresión de RAC3 son regulados diferencialmente en células senescentes. Para ésto se trabajó sobre un modelo de células normales WI38 y dos estímulos inductores de senescencia: H2O2 (daño genómico) o Rapamicina (citostático inhibidor de la vía mTOR). Se determinó  arresto celular por tinción con cristal violeta a 3 días postratamiento frente a estos estímulos. Se observó por microscopia de fluorescencia y tinción con Hoescht aumento en el tamaño nuclear: 10% de núcleos gigantes y células binucleadas a 6 días postratamiento con Rapamicina. Se determinó por Western blot que el factor de transcripción anti-edad FOXO3A, que se inactiva por fosforilación, disminuyó 56% su fosforilación a las 24hs luego de la inducción con H2O2. Sin embargo, esta fosforilación aumentó 42%, junto con la disminución del 24% de los niveles de la deacetilasa anti-edad SIRT1, 24hs postratamiento con Rapamicina. Observamos por Western blot que RAC3 sufre una disminución en sus niveles proteicos de 23% a las 24hs posteriores a dosis subletales de H2O2 y de 12%, 70% y 46% a las 24hs, 3 días y 6 días respectivamente, luego del estímulo con Rapamicina Estos hallazgos sugieren la importancia de la disminución de la expresión de RAC3 en la entrada a la senescencia y su posible participación en los cambios de heterocromatinización, contrariamente a la sobreexpresión  descripta en las células tumorales