RAC3 inhibe la autofagia independientemente de su acción nuclear y por medio de la kinasa p38

P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; C. ALVARADO; M.F. RUBIO; M. RUIZ GRECCO; S. MICENMACHER; M. COSTAS

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XXX Reunión de trabajos y Actualización Post ASCO; 2010

AAOC

RAC3, un coactivador nuclear de receptores de hormonas esteroideas sobreexpresado en tumores, es además coactivador de NF-kB, y tiene la actividad citoplasmática de inhibir la apoptosis y regular la activación de las kinasas (p38 y Akt). La autofagia es un mecanismo que actúa como supresor del desarrollo tumoral en etapas tempranas o lo favorece en etapas tardías. A pesar de que la activación de NF-kB o de p38 inhibe la autofagia, se desconoce si RAC3 puede modularla. El objetivo del trabajo fue evaluar si RAC3 puede regular la autofagia y su posible mecanismo de acción. Células de la línea HEK293 fueron transfectadas para sobreexpresar RAC3 ó RAC3 mutado en su capacidad de migrar al núcleo ó RAC3 más IKBss (IKB super-represor con capacidad de inhibir constitutivamente a NF-kB), o con vector vacío como control. Las células fueron incubadas en condiciones de ayuno por 6hs, y se analizaron niveles de autofagia por tinción con MDC en el microscopio de fluorescencia. Las células positivas fueron contadas sobre un total de 200 células. Para evaluar el rol de kinasas, se hicieron los experimentos en presencia de inhibidores específicos de p38 (SB202190) o Akt (LY294002).  En ayuno, sólo el 10% de las células que sobreexpresaban RAC3 tenían autofagia, mientras que el control mostró un 70% de células positivas (p<0,01). Cuando se realizó la transfección con RAC3 mutado o RAC3/IKBss, los niveles de autofagia fueron del 35-30%. Cuando se inhibió p38 en las células con alto RAC3, los niveles de autofagia igualaron al control (65%). La sobreexpresión de RAC3 puede inhibir la autofagia, y su mecanismo de acción podría ser independiente de NF-kB e involucrar la activación de p38. Este sería otro mecanismo por el cual RAC3 podría contribuir al desarrollo tumoral. Estos resultados permitirían el reconocimiento de nuevos blancos terapéuticos para el tratamiento oncológico.