CÉLULAS PERSISTENTEMENTE INFECTADAS CON HIV-1: SENSIBILIDAD FRENTE A INDUCTORES EXTERNOS DE APOPTOSIS

P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; D. A. RIVA; S. E. MERSICH; L. A. MARTÍNEZ PERALTA

Mar del Plata. Argentina

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y la Sociedad Argentina de Inmunología (SAIC/SAI); 2004

Un efecto in-vitro previamente descrito del virus de la Inmunodeficiencia Humana Tipo 1, HIV-1, es modificar el estado redox de la célula infectada, asi como aumentar la sensibilidad de líneas celulares T frente a distintos inductores de apoptosis, como la Staurosporina (St). En este trabajo, se estudia el comportamiento in-vitro de la línea celular H9/HTLVIIIB, de origen linfoide, persistentemente infectada con HIV-1 frente a la acción de H[2]O[2] y St, que tienen distintos blancos celulares. Los niveles de apoptosis, después de un tratamiento de 24hrs con H[2]O[2] 200uM o St 1uM, fueron medidos a través de una tinción simultánea con anexina-V / Ioduro de Propidio (IP) y reactivo de Hoeschst. Asimismo, se controló la viabilidad celular midiendo la funcionalidad de la succinato dehidrogenasa mitocondrial (reactivo de MTT). Los dos reactivos inductores de apoptosis fueron controlados en otras líneas celulares T no infectadas. Las células persistentemente infectadas H9/HTLVIIIB presentaron un 75% de células viables (MTT) y un aumento de apoptosis total de 18% frente al H[2]O[2], con respecto al control sin tratamiento. Asimismo, en presencia de St presentaron una mínima viabilidad (entre 3-6%, por MTT) y una disminución de 10% en la apoptosis total con respecto a los controles sin tratar. Estos resultados demuestran que la línea persistentemente infectada con HIV-1 responde a ambos estímulos externos, si bien con menor sensibilidad a St que lo previamente observado en infecciones agudas in-vitro con HIV-1. Por lo tanto, la sensibilidad frente al H[2]O[2] sugiere que la apoptosis puede ocurrir por via mitocondrial, con una modificación del estado redox, o con activación de algún otro factor o enzima celular por acción de una proteína viral, tal como se ha descrito en una infección aguda para HIV-1. En contraste con ésta, cuando el blanco es el núcleo celular, las células persistentemente infectadas demuestran una resistencia a la apoptosis.