RAC3, COACTIVADOR DE RECEPTORES NUCLEARES Y NF-KB, PROMUEVE LA TUMORIGÉNESIS COMO FACTOR ANTIAPOPTÓTICO, PROLIFERATIVO Y TRANSFORMANTE

M.F. RUBIO; S. MICENMACHER; C. ALVARADO; M. RUIZ GRECCO; P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; M. COSTAS

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

SAIC

Demostramos previamente que RAC3 es un coactivador de NF-kB, promueve la proliferación celular, se encuentra sobreexpresado en células leucémicas e inhibe la apoptosis por mecanismos nucleares y citoplasmáticos. También habíamos observado que Ciclina D1 reprime la actividad transcripcional de NF-kB y esta inhibición es revertida por sobreexpresión de RAC3.  Este antagonismo a nivel transcripcional coincide con los resultados obtenidos en ensayos de proliferación de la línea HEK 293. Para evaluar si este efecto antagónico también alteraba la capacidad de RAC3 de estimular el crecimiento en ausencia de anclaje, células HEK 293, incapaces de crecer en estas condiciones, fueron transfectadas con vectores que expresan RAC3 y/o CD1 realizándose ensayos de crecimiento en soft agar. Tras 40 días se observó que la sobreexpresión conjunta de ambos revierte el efecto obtenido en las que sobreexpresan CD1 o RAC3 (80 ± 10 alto RAC3 versus 3 ±1 alto RAC3 + CD1 número de colonias por campo).  Por otro lado, CD1 es reclutado a secuencias kB de su propio promotor en condiciones basales mientras que la unión de NF-kB coincide con la disminución de la unión de CD1. Para evaluar si CD1 era capaz de reclutar proteínas co-represoras a dichas secuencias se realizaron ensayos de ChIP  a distintos tiempos  (15, 30, 60 y 180 min) post-tratamiento con PMA (10 ng/ml). Los resultados obtenidos demuestran que el reclutamiento de la histona deacetilasa1  coincide con la unión de CD1 mientras que RAC3 es detectado cuando NF-kB se encuentra unido al ADN. CD1 ejercería su efecto inhibitorio sobre NF-kB vía el reclutamiento de co-represores a nivel del promotor. RAC3 es un factor transformante que coopera en la proliferación celular aumentando la expresión de CD1, la cuál a su vez controla su propia expresión por retroalimentación negativa. Si bien la sobreexpresión de alguna de estas moléculas contribuye al desarrollo tumoral, su descontrol y sobreexpresión simultánea puede resultar anti-tumoral.