RESISTENCIA A LA APOPTOSIS EN CÉLULAS CRÓNICAMENTE INFECTADAS CON HIV-1

P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; D. A. RIVA; M. BIBINI; R. LUZZI; M. SARACCO; S. E. MERSICH; L. A. MARTÍNEZ PERALTA

Mar del Plata. Argentina

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y la Sociedad Argentina de Inmunología (SAIC/SAI); 2006

La supervivencia de reservorios virales es uno de los más importantes inconvenientes que existen para lograr la erradicación de la infección de HIV-1. Para analizar el efecto citopático del virus en dichos reservorios, células persistentemente infectadas fueron tratadas con diversos inductores de apoptosis. Las líneas persistentemente infectadas (H9/HTLVIIIB, J1.1 y U1), y no infectadas (H9, Jurkat y U937) fueron tratadas con STS o H2O2.  Controles sin tratamientos (C) fueron realizado en paralelo. A las 24 horas post-tratamiento,  se evaluó: a) niveles de apoptosis temprana (annexina-V/IP); b) niveles de apoptosis tardía (Hoechst y APO-BRDU); c) viabilidad celular (reactivo de MTT); y d) producción de antígeno p24 (ELISA). La inducción de la producción viral fue ensayada en J1.1 y U1 con TNF -α y PMA respectivamente. Para el análisis estadístico, se realizó un ANOVA. El tratamiento con 0,1 μM STS resultó en 13% (H9/HTLVIIIB), 7,5% (J1.1) y 13,2% (U1) de apoptosis temprana, mientras que en las H9, Jurkat y U937 los valores fueron mucho mas altos: 50%, 45% y 55% respectivamente (p<0,01).  Con respecto al tratamiento con H2O2 (10 μM), los resultados fueron similares: 45% (H9/HTLVIIIB) y 60% (H9); 16% (J1.1) y 40% (Jurkat) (p<0,01). El ensayo con 50 μM H2O2  presentó un 35% de apoptosis en U937 y 16,5% de apoptosis en U1 (p<0,01). Estos resultados fueron confirmados por los análisis de MTT y de APO-BRDU. Las células infectadas presentaron una disminución significativa de los niveles p24 en ambos tratamientos. El aumento de p24 en J1.1 y U1 no afectó la viabilidad de las células. Se concluye que las líneas persistentemente infectadas pueden resultar resistentes a agentes proapoptóticos en comparación con las líneas no infectadas, independientemente de la replicación viral. Esta resistencia in vitro podía ayudar a comprender mejor la alta supervivencia in vivo de los reservorios virales y por ende, la persistencia de la infección de HIV.