LA AUTOFAGIA PROTECTORA CONTRIBUYE A LA SUPERVIVENCIA DE CÉLULAS PERSISTENTEMENTE INFECTADAS CON HIV-1

P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; D. GRASSO; M. VACOTTO; M.I. VACCARO; L. A. MARTÍNEZ PERALTA

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

SAIC

Las células que actúan como reservorios para el HIV resisten a la muerte  por diferentes mecanismos. Resultados previos  de nuestro grupo demostraron que líneas celulares persistentemente infectadas con HIV son resistentes a la apoptosis mediante la regulación de Bax a nivel mitocondrial, independientemente de Bcl-2. Para explicar dicho fenómeno se podría invocar su mayor capacidad para realizar autofagia, con eliminación de las mitocondrias dañadas. Con este fin, células de las líneas H9 y U937, y sus clones persistentemente infectados (H9/HTLVIIIB y U1, respectivamente) fueron tratados con 0,1µM Staurosporine (STS) como inductores de apoptosis durante 24 horas. En paralelo, las mismas células fueron incubadas con medio como control negativo, o en condiciones de ayuno por 6 horas, como control positivo de autofagia.  Finalmente fueron incubadas con Monodansil-Cadaverina (MDC) 0,15 mM por 10 minutos at 37ºC y observadas en un microscopio de fluorescencia. Las células con autofagosomas fueron cuantificadas sobre un total de 200. Las líneas H9 y H9/HTLVIIIB control no mostraron autofagia, mientras que en condiciones de ayuno, ambas fueron positivas en un 50-60%. Cuando fueron tratadas con STS, sólo un 15% de las H9 fueron  positivas, mientras que las H9/HTLVIIIB mostraron un 50% de positividad para autofagosomas (p<0,01). Estos hallazgos fueron confirmados en las líneas U937 y U1, si bien se observaron niveles basales de autofagosomas. Estos resultados claramente sugieren que las células persistentemente infectadas con HIV muestran niveles elevados de autofagia cuando son tratadas con inductores de apoptosis.  La autofagia protectora podría eliminar las mitocondrias dañadas antes que la apoptosis se desencadene, lo que explicaría la disminución de los niveles de Bax en mitocondria. Esta es la primera evidencia en que la autofagia podría impedir la apoptosis en una infección viral, contribuyendo a la supervivencia de los reservorios virales.