INVESTIGADORES
FERNANDEZ LARROSA Pablo Nicolas
congresos y reuniones científicas
Título:
RESISTENCIA A LA APOPTOSIS INDUCIDA POR H2O2 ASOCIADA A LA SOBREINFECCIÓN CELULAR.
Autor/es:
P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; D. A. RIVA; M. BIBINI; S. E. MERSICH; L. A. MARTÍNEZ PERALTA
Lugar:
La Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; 7° Congreso Argentino de SIDA; 2005
Resumen:
Introducción. En un trabajo, hemos descrito la producción
de pseudotipos virales y
el incremento en la producción viral,
asociados a la
sobreinfección celular in vitro. Sin embargo,
su efecto sobre la
viabilidad celular y los posibles mecanismos
implícitos en la muerte
celular son desconocidos hasta el
momento. Materiales y
Métodos. Células H9HTLVIIIB, persistentemente
infectadas con HIVHXB2, se
sobreinfectaron a
diferentes MOIs con una
cepa viral diferente, HIVMN. Se realizó
en paralelo un control
negativo de células sin sobreinfectar.
Las células se sometieron
a un tratamiento de 200uM de
H2O2, un inductor de
apoptosis. Se realizó los controles sin
tratamiento. Las células
fueron cosechadas 24 horas post-sobreinfección
(ps). Se evaluó la
viabilidad celular por el reactivo
MTT, y los valores de
viabilidad celular para cada tratamiento
se normalizaron con
respecto a sus respectivos controles. Los
niveles de apoptosis
fueron medidos a través de una tinción
dual de anexina-V / Ioduro
de Propidio (IP) y se recolectaron
10.000 eventos por CMF.
Los valores fueron analizados con
el programa WinMDI 2.8 y
se muestran como la diferencia
(D) entre el tratado y el
control. Diferencias menores del 5%
fueron consideradas no
significativas. Resultados. La viabilidad
celular no mostró
diferencias significativas entre los distintos
tratamientos o MOIs de
sobreinfección, ni el análisis de
anexina-V/IP cuando se
compararon células sobreinfectadas
con las no
sobreinfectadas. El tratamiento de H2O2 produjo
per se un aumento del 16% de células anexina-V positivas
respecto
a las no tratadas. Las
células sobreinfectadas y tratadas
presentaron una reducción
significativa con respecto a
las no sobreinfectadas y
tratadas según la MOI: D(MOI 0.01):
-17%, D(MOI 0.1): -11.3%, D(MOI 1): -6.4%. Conclusión. La
sobreinfección de células
H9HTLVIIIB no produjo un aumento
de los niveles de
apoptosis a las 24 horas ps sino resistencia
al tratamiento de H2O2.
Este mecanismo podría ser relevante
in vivo en la fisiopatología de la infección de HIV.
