EL COACTIVADOR DE RECEPTORES NUCLEARES RAC3 INHIBE LA AUTOFAGIA

P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; M. RUIZ GRECCO; C. ALVARADO; M.F. RUBIO; S. MICENMACHER; M. COSTAS

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

SAIC

El coactivador de receptores nucleares RAC3 esta  sobreexpresado naturalmente en diversos tumores. Demostramos que RAC3 es un coactivador del factor de transcripción NF-kB, involucrado en respuestas proliferativas, anti-apoptóticas, y de diferenciación. A pesar de que RAC3 tiene actividad anti-apoptótica, se desconoce su capacidad de regular la autofagia. Sin embargo, se sabe que al aumentar la actividad de NF-kB, la autofagia es inhibida; y que la autofagia actúa como supresor del desarrollo tumoral en etapas tempranas. Por ende, nuestro objetivo fue evaluar si RAC3 modula la autofagia, y si dicha modulación es vía la activación de NF-kB. Células de la línea celular HEK293 fueron transfectadas con un plásmido que expresa RAC3 o con el vector vacío como control. Luego de 24 hs, las células fueron incubadas en condiciones de ayuno durante 6 hs, y tratadas con MDC para detectar la formación de autofagosomas. Las células con autofagia fueron observadas en un microscopio de fluorescencia, y contadas sobre un total de 200 células. Para analizar si su acción es vía NF-kB, las células fueron transfectadas con RAC3 mutado en su capacidad de migrar al núcleo, o cotransfectadas con RAC3 e IKBss (IKB super-represor con capacidad de inhibir constitutivamente a NF-kB). En condiciones de ayuno, las células transfectadas con RAC3 sólo mostraron autofagia en un 10%; mientras que en el control, el porcentaje de células positivas aumentó a un 70% (p<0,01). Cuando se realizó la transfección con RAC3 mutado o la cotransfección RAC3/IKBss, los niveles de autofagia fueron del 35-30%. En conclusión, la sobreexpresión de RAC3 puede inhibir la autofagia inducida por ayuno, y dicha modulación sólo puede ser explicada parcialmente por la activación de NF-kB. Es posible que RAC3 tenga la capacidad de modular los niveles de autofagia a nivel citoplasmático, sin la necesidad de migrar al núcleo y activar a NF-kB. Este sería otro mecanismo por el cual podría contribuir al desarrollo tumoral.