ACTIVACIÓN TEMPORAL DE LA PRODUCCIÓN VIRAL DEBIDA A LA SOBREINFECCIÓN IN VITRO CON UNA CEPA DIFERENTE HIV-1

P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; A. CEBALLOS; R.D. RABINOVICH; S. MARQUINA; L. A. MARTÍNEZ PERALTA

Buenos Aires, Argentina

Congreso; Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología.; 2000

Sociedad Argentina de Virología.

Introducción: Actualmente, se ha demostrado in vitro e in vivo la sobreinfección con cepas diferentes de HIV-1. La  sobreinfección  es causa de la alta frecuencia de recombinantes circulantes a   nivel mundial. Sin embargo, no existen suficientes trabajos sobre la cinética de producción viral de células sobreinfectadas. Esta información es de interés ya que en  pacientes infectados la producción viral es alta y se acumulan variantes distintas a través del tiempo generando las condiciones para este fenomeno. Materiales y métodos: Con el objetivo de evaluar si existe reactivación en la producción de antígeno o virus a raiz de la sobreinfección, células de la línea H9-HTLVIIIB persistentemente infectadas con la cepa HXB2 fueron sobreinfectadas con la cepa MN (m.o.i.=1) por un método previamente desarrollado en nuestro laboratorio. Se tituló la producción viral  por formación de sincicios en células MT2, metodo de punto final y la producción de antigeno p24 con un ELISA comercial (COULTER Estados Unidos). El virus amplificado por las MT2 fue caracterizado por neutralización con una anticuerpo monoclonal antiHXB2 y por amplificación de la región C2V3 del gen env en una nested-PCR seguida de digestión con una endonucleasa que presenta diferente patrón de corte para las dos  cepas virales.(BsmAI) Resultados: En las células sobreinfectadas se  encontró genoma de ambas cepas al menos hasta el día 8, pero la proporción del genoma de la cepa sobreinfectante decrece rápidamente después del día 4 siendo indetectable al día 12  y posteriores. En el día 1 post-sobreinfección se produjo un incremento de 30 veces en la producción de antígeno p 24  y de 2 log en la producción de virus infeccioso, sin embargo los títulos en los días posteriores no difieren significativamente de los controles no sobreinfectados. La caracterización del virus producido mostró que el día 1 se producen ambas cepas virales en cantidades similares, en tanto que en los días 2 y posteriores se detecta sólo la cepa primoinfectante. Conclusiones: La sobreinfección de la línea celular H9-HTLVIIIB con la cepa MN produjo un aumento transitorio de la producción viral total, que incluye una reactivación de la cepa primoinfectante. Es probable que este mecanismo juegue un papel importante en la fisiopatogenia  de la infección por HIV-1