EL AUMENTO DE P21, GEN RESPONSABLE DEL ARRESTO CELULAR, INDUCE EL AUMENTO DE RAC3, EL CUAL PRODUCE UN FENOTIPO TUMORAL

S. MICENMACHER; C. ALVARADO; P. N. FERNÁNDEZ LARROSA; M.F. RUBIO; M. RUIZ GRECCO; M. COSTAS

Buenos Aires

Jornada; VIII Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; 2009

Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari – UBA.

En la progresión tumoral, una célula normal acumula mutaciones para adquirir características neoplásicas. Finalmente, se frena la proliferación celular para diferenciarse a células con la capacidad de migrar e invadir otros tejidos (transición epitelio-mesenquimática). El coactivador de receptores nucleares RAC3 se encuentra sobreexpresado en varios tumores y esto correlaciona con la progresión de los mismos. Hemos demostrado previamente su rol como coactivador del factor de transcripción NF-kB, vía el cual controla la expresión de genes anti-apoptóticos y se ve involucrado en la proliferación celular, como así también en el control de la expresión de genes marcadores de la transformación celular. Demostramos previamente que el aumento de RAC3 por transfección de células no tumorales embrionarias de riñón humano HEK293, tiene un rol transformante: induce el aumento de expresión de Vimentina, gen blanco de NF-κB, asociado a la transición epitelio-mesenquimática e invasividad y considerado marcador tumoral. Debido a este cambio, las células pueden crecer independientemente de anclaje. Dado que la transformación requiere arresto del ciclo celular, se quiso determinar la relación entre la proteína supresora del ciclo celular p21 y RAC3. Ambos genes se encuentran en niveles prácticamente indetectables en las células HEK293. Observamos que el aumento de p21 por transfección de estas células provoca: 1) aumento de RAC3 de 230% comparadas con células de tipo salvaje. 2) Por microscopia de inmunofluorescencia se determinó que se produce un aumento de la localización nuclear de RAC3. 3) Por ensayos reporteros de la actividad NF-κB bajo estímulo con TNF-a, detectamos  tal como ocurre con la sobreexpresión de RAC3, un aumento 570% y 835% en los niveles de actividad de NF-κB a las 14hs y 21hs respectivamente. 4) aumento significativo en la expresión de Vimentina respecto de las células control (niveles normales de p21 y RAC3) y aún en ausencia de estímulo activador de NF-κB. Concluimos que el aumento de p21 producido en el arresto celular induce el aumento en los niveles de RAC3, su localización nuclear y un aumento de la actividad NF-kB, facilitando la capacidad transformante de este coactivador.