El factor de necrosis tumoral alfa (TNFa) induce la expresion del factor inhibidor de leucemias (LIF) en células epiteliales mamarias a través de la activación de ERK1/2

CAROLINA SCHERE LEVY; MATÍAS BLAUSTEIN; ALBANA GATTELLI; PELISCH FEDERICO; OMAR COSO; ANABELLA SREBROW; EDITH KORDON

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual SAIC; 2005

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Hemos previamente demostrado que, en la glándula mamaria del ratón, la expresión del factor inhibidor de leucemia (LIF) se incrementa rápidamente a pocas horas de finalizado el amamantamiento. También hemos reportado que en este tejido el perfil de expresión de TNFa es muy similar al de LIF. Esta última observación nos llevó a investigar y determinar que el primero induce la expresión del segundo en células epiteliales mamarias SCp2. El objetivo del presente trabajo fue investigar los caminos de señalización involucrados en esta inducción. Por análisis Western blot hallamos que el tratamiento de dichas células con TNFa induce la activación de ERK1/2 a los 5 min. y la de JNK a los 30 min., cuando los niveles de P-ERK1/2 habían vuelto a niveles basales. Utilizando un vector reportero NFkB-LUC también hallamos que TNFa induce la activación de este factor de transcripción. Con el objeto de determinar cuáles de estas vías son relevantes en la inducción de la expresión de LIF, células tratadas con TNFa fueron colocadas en presencia de diferentes inhibidores farmacológicos específicos. Los resultados obtenidos por RT-PCR de Tiempo Real indican que el inhibidor de la fosforilación de ERK1/2 (PD 098059) inhibió la inducción provocada por el tratamiento con TNFa. Sin embargo, tanto el tratamiento con el inhibidor farmacológico de JNK (SP600125) como el inhibidor de NFKb (Sulfazalacina) indujo la sobre-expresión (por encima del tratamiento con TNFa sólo) de LIF. mientras que la expresión del LIF fue inhibida con el agregado de inhibidor de ERK1/2. En células tratadas con estos inhibidores, análisis de Western blot de demostró que mientras que el PD 098059 inhibía la activación de ERK1/2, el tratamiento con SP600125 y con Sulfazalacina llevó a la sobre-activación de esta MAPK. Estos resultados muestran el rol fundamental que juega ERK1/2 en la inducción de la expresión de LIF y sugieren que la activación de JNK y de NFkB podrían modular negativamente de esta inducción.