Cascada de señales y expresión de genes inducidas por estiramiento mecánico en el epitelio mamario

ANA QUAGLINO; TAMARA TANOS; OMAR COSO; EDITH KORDON

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Reunión Anual SAIC; 2005

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Se ha reportado que la fase inicial de la involución post-lactancia de la glándula mamaria se caracteriza por la apoptosis de las células secretorias. El inicio de este proceso depende de señales locales inducidas por la acumulación de leche en los espacios lobulillares. El objetivo de este trabajo fue investigar el efecto desencadenado por el estiramiento mecánico de células epiteliales mamarias, como modelo de lo que ocurre en los lobulillos mamarios al suspenderse el amantamiento. Para ello se diseñó especialmente un dispositivo que permite el estiramiento de células crecidas en monocapa. Así, células epiteliales mamarias HC11 fueron cultivadas sobre membranas de siliconas cubiertas de colágeno y al llegar a un 80% de confluencia fueron estiradas un 20% durante distintos tiempos, en un intervalo de 2minutos a 4horas. Dado que se ha reportado que durante la involución mamaria se produce la activación de cascadas de señalización que involucran la fosforilación de las MAPKs ERK1/2 y del factor de transcripción STAT3, así como la inducción de la expresión de genes como c-fos y LIF, se procedió a determinar si el estiramiento mecánico por si mismo era capaz de inducir tales cambios. Por análisis de Western blot, hallamos que el estiramiento indujo activación de ERK1/2 y STAT3 que alcanzó su máximo entre los 5 y 15 minutos y desapareció a la 1/2 hora de iniciado el estímulo. Por otro lado, por experimentos de PCR en Tiempo Real, hallamos que el mismo nivel de estrés mecánico indujo un aumento de la expresión del mensajero de LIF (2.5 veces con respecto al control) y de c-fos (20 veces respecto al control). Estos resultados muestran la validez de un nuevo método para investigar el efecto del estiramiento sobre las células epiteliales e indica que el estrés mecánico podría desencadenar por sí mismo eventos de importancia fundamental para la apoptosis del epitelio mamario durante la involución post-lactancia.