Desarrollo de un modelo para analizar el efecto del estrés mecánico en células epiteliales mamarias.

QUAGLINO A.,; SALIERON M.,; JESICA PELLEGROTTI; COSO O; KORDON E,

Mar del Plata,

Congreso; SAIC 08; 2008

Al finalizar la lactancia, en la glándula mamaria se desencadena un proceso que llevará a en su primera etapa a la apoptosis masiva del epitelio secretorio de leche. Se ha demostrado que son factores locales del tejido mamario como la citoquina LIF los responsables de iniciar este proceso. Hasta el momento, se desconoce cuáles son las señales específicas que desencadenan la liberación de estos factores, pero se hipotetiza que el estrés mecánico inducido por la acumulación de leche en los lobulillos podría ser el estímulo inicial.Con el objetivo de probar esta hipótesis diseñamos y validamos un dispositivo que nos permite analizar in vitro el efecto que tiene el estrés mecánico sobre células epiteliales mamarias (HC11) crecidas sobre un sustrato de silicona elástica. Primero, verificamos por microscopía óptica la transmisión del estiramiento radial aplicado (ERA) del sustrato flexible a las células. Luego, estudiamos el efecto que ejerce dicho estímulo sobre la vía de señalización de MAPK, la activación de Stat3 y la inducción de la expresión de genes involucrados en la involución mamaria. Los resultados muestran que el estiramiento indujo un pico de activación de ERK1/2 y Stat3 entre los 5 y 15 minutos de ERA el cual desaparece a la media hora. Para Stat3, pero no para ERK1/2, se observa un segundo pico de activación a las 6hs (Western blot). Por otro lado, ERA aumentó significativamente los niveles de ARNm de c-fos de manera dosis dependiente (RT-PCR) y los niveles de expresión y activación de la proteína correspondiente (Western blot). Asimismo un ERA del 20% produjo un aumento de la expresión del ARNm (RT-PCR) de LIF y TNFa a los 30 min de tratamiento. Estos resultados indican que el estrés mecánico podría ser el disparador de eventos biológicos asociados a la involución mamaria ya que es capaz de inducir cascadas de señalización y genes que juegan un rol fundamental en este proceso biológico.