Determinación de la ubicación de contactos entre neuronas mediante reconstrucciones detalladas

SERGIO DAICZ ; LIDIA SZCZUPAK.

Huerta Grande, Córdoba

Congreso; X Taller de Neurociencias; 2008

El Sistema Nervioso Central de la sanguijuela Hirudo Medicinalis es unmodelo ideal para estudiar redes sensoromotoras. Cada ganglio controlaun segmento del cuerpo, enervando la periferia y recibiendo de ellaseñales sensoriales y enviando señales motoras. Dentro de cada ganglio,las neuronas pueden ser identificadas por la posición y tamaño de sussomas y sus propiedades electrofisiológicas. Por estas características, lapresencia o no de una conexión directa, sináptica o electrotónica, entredos neuronas identificadas es, relativamente sencilla de establecer. Sinembargo, no alcanza únicamente con determinar la presencia de conexiónpara caracterizar la interacción entre dos neuronas. Entre otros factores, ladistribución de los contactos a lo largo de sus árboles dendríticos puedejugar un papel clave en el efecto que tendrán las interacciones entre ellas,y en cómo las percibimos a través de registros somáticos.Para estimar la ubicación de los posibles contactos entre pares deneuronas de un mismo ganglio que sabemos conectadas, seguimos elsiguiente procedimiento. Teñimos el par inyectando por iontoforésis unfluoróforo distinto en cada una (Rhodamina Dextrano y Alexa Fluor 488Dextrano). Obtenemos imágenes de alta resolución en dos canalesutilizando un microscopio confocal. Luego tomamos cada canal porseparado y reconstruimos cada neurona independientemente usando elprocedimiento ?semiautomático? descripto en un taller anterior. Una vezobtenido un modelo morfológico de ambas neuronas podemos ubicar lospuntos en donde sus neuritas se acercan a una distancia menor a unadeterminada.Si bien la cercanía de las neuritas no es garantía de que se produzca unaconexión, la información obtenida será incorporada en un modelocomputacional del que se obtendrán predicciones que luego podrán sercorroboradas experimentalmente.