Efecto de una Gonadotropina Coriónica Equina recombinante (reCG) sobre el recuento de folículos antrales destinados a OPU en vacas Holando Argentino en primer tercio de lactancia

ODRIOZOLA ME; MOLINA ME; NOTARO US; GROTTER L; CATTANEO L; BARBERIS F; ORTEGA HH; CETICA PD; DIAZ PU; GAREIS NC

Esperanza, Santa Fe

Jornada; XI JORNADA DE DIFUSIÓN DE LA INVESTIGACIÓN Y EXTENSIÓN; 2024

Facultad de Ciencias Veterinarias UNL

La técnica de aspiración folicular guiada por ultrasonografía (OPU, del inglés ovum pick up) seguida dela producción de embriones in vitro depende en gran medida de la cantidad y calidad de los complejoscúmulo-ovocito (COCs) recolectados de la donante. La cantidad de COCs colectados está relacionadacon el recuento de folículos antrales (RFA) de cada animal y es un parámetro que puede limitar laeficiencia de la técnica, ya que a partir de los folículos se obtienen los COCs para posteriormentemadurarlos, fecundarlos y cultivarlos hasta llegar al estadio de blastocisto. Diversos autores handemostrado que el RFA se encuentra estrechamente relacionado con la subespecie, raza y edad de lasvacas1. Por otro lado, los ovocitos recolectados de folículos que miden entre 4 y 10 mm de diámetrotienen mayor capacidad de desarrollo embrionario, mientras que los provenientes de folículos mayoresa 10 mm suelen ser expandidos o atrésicos y las tasas de recuperación pueden ser bajas. La OPU puederealizarse en cualquier momento del ciclo estral, sin embargo se debe tener en cuenta que el número ytamaño de los folículos disponibles al momento de la aspiración será variable dependiendo de la fasedel ciclo estral en que se realice. La sincronización de las ondas foliculares puede mejorar el rendimientode la OPU, ya que se logra la estandarización del desarrollo folicular de las vacas que serán sometidasa esta técnica. Esta sincronización se puede lograr de manera mecánica, por ejemplo mediante laaspiración del folículo dominante o bien, farmacológicamente a través del uso de hormonas comoestradiol (E2) y progesterona (P4)2. Para que la producción de embriones in vitro sea eficiente esnecesario colectar la máxima cantidad COCs viables por sesión de OPU. Por esta razón, durante lasúltimas décadas se han utilizado diversas estrategias, como ser el uso de somatotropina bovina, laadministración de anticuerpos contra la inhibina y la administración exógena de gonadotropinas. Esteúltimo ha sido el método predilecto para aumentar el número de folículos. Las hormonas comúnmenteutilizadas son: la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH), la gonadotropina coriónica equinasérica (eCG) o recombinante (reCG) y la hormona foliculoestimulante (FSH). La reCG se ha comenzadoa utilizar en diferentes biotecnologías reproductivas, como por ejemplo en IATF3 y si bien existenensayos en vacas lecheras Holando Argentino, ninguno se ha enfocado en la aplicación de esta hormonapara protocolos de OPU. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de 3 dosis de reCG sobreel RFA en vacas lecheras en primer tercio de lactancia comparándolas con un grupo control sintratamiento foliculoestimulante, con la finalidad de optimizar la dosis y el momento ideal para la OPU.Para el desarrollo del presente trabajo, se utilizaron 29 vacas multíparas Holando Argentino en el primertercio de lactancia (entre 50 y 70 días posparto) con una condición corporal entre 2,5 y 3,5 (escala del 1al 5) provenientes de un establecimiento lechero ubicado en Hipatia, Santa Fe. El día 0 se realizó lasincronización del ciclo estral mediante la aplicación de un dispositivo intravaginal de progesterona(Diprogest 1200, Ceva-Zoovet), 2 mg de benzoato de estradiol IM (Ceva-Zoovet) y 0,150 mg deprostaglandina IM (Ciclar, Ceva-Zoovet). El día 4, las vacas fueron divididas al azar en 4 grupos, 1control y 3 tratados a los que se les aplicaron diferentes dosis de reCG IM (Folirec, Ceva-Zoovet): GrupoControl (n=6) sin aplicación de reCG, Grupo reCG D1 (n=7): 1000 UI, Grupo reCG D2 (n=8): 1500 UIy Grupo reCG D3 (n=8): 2000 UI. El día 8 del protocolo se retiró el dispositivo de P4. Desde el día 5 al 8 se realizó el seguimiento ultrasonográfico en modo B con un equipo de ultrasonido portátil Z6 Vet(Mindray), acoplado a un transductor lineal transrectal de 5.0 a 10 MHz (75L50EAV, Mindray)utilizando una frecuencia de 7,5 MHz y una ganancia de 80 dB. Se guardaron videos de cada día y decada animal y se realizó el conteo y la medición de los folículos. Estos fueron clasificados por tamañoen: pequeños (< 6 mm), medianos (6-10 mm) y grandes (> 10 mm)4. Para el análisis de los datos seutilizó el programa SPSS 22.0 y se aplicó un modelo lineal generalizado mixto para medidas repetidas,considerando un p < a 0,05 como significativo.No se encontraron diferencias significativas para el RFA pequeños y grandes en los 3 gruposestimulados con reCG con respecto al grupo control a lo largo del protocolo, tampoco para el RFAmedianos los días 5 y 6. En cambio, al día 7 se encontraron diferencias significativas para el RFAmedianos en los grupos reCG D1 (7,18 ± 2,98), reCG D2 (7,98 ± 2,92) y reCG D3 (11,21 ± 2,92) conrespecto al grupo control (1,69 ± 3,06). También se hallaron diferencias significativas el día 8 para elRFA medianos en el grupo reCG D1 (4,46 ± 2,70), reCG D2 (5,73 ± 2,66) y reCG D3 (8,71 ± 2,66)respecto al control (0,52 ± 2,74).En conclusión, la reCG aumentó el RFA medianos el día 7 y 8 del protocolo en las tres dosis utilizadas.Esto podría sugerir que el momento ideal para OPU utilizando las dosis baja/media/alta sería el día 7 o el día 8 (72 h o 96 h posteriores a la aplicación de reCG). Sin embargo, se considera necesario ampliarla cantidad de animales por grupo y además analizar la irrigación de los folículos mediante ecografíaDoppler y la calidad de los ovocitos provenientes de los distintos momentos para presentar un protocolode estimulación hormonal definitivo.