EVALUACIÓN DE PROTOCOLOS DE IATF SOBRE LA EXPRESIÓN PROTEICA DE RECEPTORES ENDOMETRIALES EN VACAS DE CARNE

TRUCCO, F. T.; ANGELI, E.; NOTARO, U.; BELOTTI, E. M.; AHIBE, M. E.; ANDRÉS SOTO, T.; SALVETTI, N. R.; ORTEGA, H. H.; DÍAZ, P.U.

Jornada; VI Jornadas internacionales Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal (INITRA); 2021

La utilización de protocolos de sincronización hormonal que prolongan el tiempo de proestro han sido relacionados con mayores tasas de preñez en programas reproductivos. Algunos autores sugieren que la exposición del endometrio a concentraciones séricas de estrógenos por un periodo mayor de tiempo da lugar a un amiente endometrial más apto para la sobrevida del conceptus en las etapas embrionarias iniciales. La biopsia endometrial ofrece un gran potencial para lograr una mejor compresión de los mecanismos celulares y moleculares que ocurren durante el ciclo estral. El objetivo del presente trabajo fue comparar el efecto de tres protocolos de sincronización de la ovulación, dos con proestro corto y uno con proestro extendido, sobre la expresión proteica de los receptores de estrógenos alfa (RE alfa), receptores de estrógenos beta (RE beta) y receptores de progesterona (RP) a nivel endometrial el día 15 post-ovulación durante las etapas iniciales del reconocimiento materno de la gestación. Se utilizaron 30 vacas Aberdeen Angus sin cría al pie, con un postparto ≥ 90 días y con una condición corporal promedio ≥ 3.5 (escala de 1 a 5). Las vacas fueron asignadas en forma aleatoria a cada uno de los 3 protocolos, seleccionándose sólo aquellas que presentaron un cuerpo lúteo (CL) y/o folículo dominante (FD) ≥10 mm al inicio del ensayo. El grupo 1 (proestro extendido) recibió el Día 0: un dispositivo de P4 + 0,021 mg de GnRH. Día 5: retiro del dispositivo de P4 + 0,150 mg de PGF2α. Día 8: 0,021 mg de GnRH. El grupo 2 (proestro corto con GnRH) recibió el Día 0: un dispositivo de P4 + 0,021 mg de GnRH. Día 7: retiro del dispositivo + 0,150 mg de PGF2α. Día 9: 0,021 mg de GnRH. El grupo 3 (proestro corto convencional) recibió el Día 0: un dispositivo de P4. Día 7: retiro del dispositivo de P4 + 0,150 mg de PGF2α + cipionato de estradiol. Se obtuvieron muestras de tejido uterino el día 15 post-ovulación, mediante biopsias realizadas con la ayuda de sedación y anestesia epidural baja. Se introdujo la pinza para biopsias a través de la vagina y se la guió por palpación trans-rectal hasta contactar con el cérvix. Luego, mediante la técnica de enhebrado cérvico-uterino se atravesó el cérvix y se deslizó la pinza hacia uno de los cuernos del útero donde se obtuvo la muestra de tejido endometrial. Una vez obtenidas fueron fijadas a campo e identificadas para su posterior procesamiento. En el laboratorio se incluyeron en parafina y se realizó la técnica de inmunohistoquímica indirecta utilizando anticuerpos específicos. Para cada receptor se estimó el porcentaje del área inmunomarcada tanto en el epitelio como en las células glandulares superficiales y profundas del endometrio. Todos los datos obtenidos fueron analizados mediante ANOVA, seguido de un postest de Duncan. El presente estudio no encontró diferencias significativas en la expresión proteica nuclear de RE alfa y RE beta en las células del epitelio, glándulas superficiales y profundas del endometrio entre los distintos tratamientos hormonales evaluados. Además, no se hallaron diferencias al comparar los niveles de expresión de RE alfa y RE beta dentro de cada grupo en las diferentes estructuras uterinas analizadas. Por su parte, en concordancia con lo descripto por otros autores, no se observó expresión nuclear de del RP al día 15 postovulación. Nuestra investigación pretende contribuir en el avance del conocimiento de los procesos que acontecen a nivel uterino y que regulan la respuesta fisiológica de las células endometriales a las variaciones en las concentraciones de las hormonas ováricas. Las mayores tasas de preñez observadas en otros estudios podrían estar asociadas mayores concentraciones de P4 como una respuesta esteroidogénica diferencial del ovario en vacas con proestros prolongados.