Cuantificación de citoquinas por RT-PCR en leche proveniente de vacas tratadas con un modificador de la respuesta biologica intramamario

BARAVALLE C,; DALLARD BE,; CALVINHO LF,; ORTEGA HH

Mar del Plata. Buenos Aires

Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clinica (SAIC 2008); 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Para el control de las infecciones intramamarias en bovinos, se ha contemplado la estimulación de la respuesta inmune inespecífica por medio del uso de modificadores de la respuesta biológica (MRB). En este sentido, nos propusimos evaluar por RT-PCR la expresión de citoquinas en leche bovina en respuesta a la inoculación intramamaria de Panax ginseng como MRB. Se recolectaron muestras de leche a las 0 hs (previa inoculación) y a las  24, 48 y 72 hs post inoculación (PI) con MRB [10 ml P. ginseng (3 mg/ml) por cuarto mamario] y placebo (vehículo). Se efectuó RT-PCR a todas las muestras utilizando primers para IL1-alfa y beta, IL-8 y TNF-alfa. El análisis semicuantitativo de las bandas obtenidas se llevó a cabo por densitometría óptica en relación a la cuantificación de la expresión de un gen normalizador (Beta-Actina). El análisis estadístico se realizó por ANOVA y test de Duncan. Las RT-PCR permitieron detectar los ARNm de las IL1 alfa y beta, IL-8 y TNF-alfa en todas las muestras evaluadas. La expresión de  IL1-alfa fue significativamente mayor (p<0.05) a las 48 hs PI en las muestras tratadas con MRB en relación a todos los periodos evaluados independientemente del tratamiento recibido, mientras que la expresión de IL1-beta fue significativamente mayor (p<0.05) en las muestras tratadas con MRB a las 24 hs con respecto a todos las muestras tratadas con placebo. Para IL-8 se halló una diferencia significativa mayor (p<0.05) a las 48 horas PI en las muestras tratadas con MRB con respecto a las tratadas con placebo. Aunque la expresión de la IL-8 fue menor a las 72 hs en relación a las muestras tratadas con MRB, a las 48 hs no se observaron diferencias significativas entre estos periodos. Para TNF-alfa no se encontraron diferencias significativas entre todos los grupos evaluados. Podemos concluir que el MRB utilizado (P.ginseng) estimuló la síntesis de citoquinas pro-inflamatorias, lo que podrá sugerir un efecto protector en la glándula mamaria bovina promoviendo la inmunidad inespecífica. Keywords: Glándula mamaria bovina. Modificador de la respuesta biológica. Citoquinas