Evaluación de la capacidad para producir Biofilm de diferentes cepas de Staphylococcus aureus aisladas de Mastitis Bovina en tambos de Córdoba, Santa Fe y Buenos Aires

CABELLO, D.; CALVET, ESTELA M.; SORIA, M.F; PEREYRA, E.A.L.

Esperanza

Jornada; IX Jornada de Difusión de la Investigación y Extensión de la Facultad de Ciencias Veterinarias; 2021

FCV UNL

La mastitis bovina es una de las enfermedades infecciosas más prevalentes del ganado vacuno que genera grandes pérdidas económicas a los productores y la industria láctea mundial.2 Si bien es causada por numerosos agentes etiológicos, Staphylococcus aureus es el patógeno más frecuentemente aislado; el mismo posee una gran capacidad para invadir las células epiteliales, formar una biopelícula y cápsulas de polisacáridos. El desarrollo de las biopelículas por parte del S.aureus facilita la adherencia y colonización en la ubre bovina. Para poder llevarlo a cabo, el patógeno debe unirse al epitelio mamario, proliferar y acumular células en multicapas4. Esto ocasiona infecciones intramamarias (IIM) persistentes difíciles de erradicar, ya que tienen mayor probabilidad de resistir y sobrevivir a regímenes de antibióticos. La producción de biopelícula, está conformada por el polisacárido poli-N-acetilglucosamin cuya síntesis esta mediada por el locus ica ABCD1 y por una proteína de la superficie bacteriana denominada bap (proteína asociada al biofilm). 3El objetivo de nuestro estudio fue establecer la capacidad para producir biofilm y la prevalencia de genes involucrados en su formación entre cepas provenientes de infecciones mamarias bovinas (IIM) de diferentes regiones de Argentina, siendo estas Córdoba, Santa Fe y Buenos Aires.Se aislaron 126 cepas de Staphylococcus aureus a partir de IIM subclínicas, 49 provenientes de la provincia de Córdoba (Río Cuarto, Río Segundo y Gral. San Martín), 37 de Santa Fe (Esperanza y Rafaela) y 40 de Buenos Aires. La evaluación de la producción de biofilm de todas las cepas se realizó mediante el método de cultivo en microplacas de poliestireno, incluyendo como control positivo la cepa Staphylococcus aureus V329 (fuerte productora de biofilm). El experimento se repitió tres veces y los resultados se expresaron como densidades ópticas (DO). Además se realizó la extracción de ADN genómico y posterior PCR de punto final para la evaluación de la prevalencia de genes que codifican para la formación de biofilm (icaA, icaD, icaC y bap). De las 49 cepas evaluadas provenientes de Córdoba, el 69,38% presentó fuerte capacidad para producir biofilm, 22,45% lo hizo en forma moderada y 8,17% en forma débil. De las cepas procedentes de Santa Fe, el 62,15%, 27,07%, 8,1 % fueron fuertes, moderadas, débiles productoras de biofilm, respectivamente. En esta provincia, sólo una cepa fue no productora de biofilm (2,77%.). En la provincia de Buenos Aires de las 40 cepas estudiadas el 42,5% presentó una fuerte capacidad de producción, el 35% presentó capacidad moderada y el 20% presentó capacidad débil; solo un 2,5% no presento capacidad de producir biofilm. En todas las regiones evaluadas, el locus ica mostró prevalencia elevada y uniforme; observándose para icaADC 100%, excepto para icaA un 22,5 % dieron negativa, mientras que el 100% resultó bap negativa. Estos resultados demostraron que en todas las regiones evaluadas, una elevada proporción de las cepas (cercana al 100%), presentaron diferentes capacidades para producir biofilm. Además se demostró que el gen bap no es indispensable para su producción, no así los genes del operón ica. Estos datos aportan información regional para el futuro diseño de inmunógenos dirigidos a prevenir las IIM por Staphylococcus aureus.