Detección de marcadores inmunoendocrinos en biopsias de endometrio de vacas lecheras: posible relación con la susceptibilidad a infecciones uterinas.

PERALTA MB, GAREIS NC, MACIEL M, SCANDOLO LUCINI D, ORTEGA HH, SALVETTI NR; REY F, VELÁZQUEZ MML.

Esperanza

Congreso; X Reunión Argentina de Patología Veterinaria. Esperanza, Santa Fe. 24-26 de agosto de 2016.; 2016

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La intensificación en la producción lechera, tanto individualcomo por unidad de superficie, y el incremento en laproducción individual está generando una mayor incidenciade enfermedades metabólico-nutricionales y de cambiosinmunológicos que interactúan con las anteriores2. Elobjetivo del presente trabajo fue identificar marcadoresinmunoendocrinos a nivel endometrial, en vacas primíparaso multíparas, con el fin de estudiar su relevancia comoindicadores moleculares del estado inmunológico quereflejen una susceptibilidad a posibles infecciones uterinas.Para ello se tomaron biopsias uterinas según la técnicadescripta por Chapwanya et al., (2010)1, de vacas lecherasde la raza Holando Argentino ginecológicamente sanas,teniendo en cuenta el momento del ciclo estral (diestro).Los grupos estudiados consistieron en animales deprimera lactancia (n = 3) y de dos o más lactancias (n =4). Las muestras de tejido obtenidas se fijaron en formolbufferado al 10% durante 6-8 h a 4°C y se procesaronhistológicamente siguiendo protocolos de rutina hasta suinclusión en parafina. Se efectuaron cortes seriados, de 4μm de espesor destinados a las diferentes evaluaciones.Para la caracterización inicial se utilizó la coloración dehematoxilina-eosina. Los marcadores de interés estudiadosen esta instancia fueron el receptor de progesterona (PR),mediador de la acción inmunosupresora de la progesterona,y los factores de crecimiento transformante β1 (TGF β1),TGFβ2 y TGFβ3. Las inmunodetecciones se efectuaronmediante inmunohistoquímica indirecta empleandoanticuerpos específicos. La reacción se reveló utilizando3,3' diaminobencidina como cromógeno y se realizócoloración de contraste con hematoxilina. Finalmente sedigitalizaron imágenes microscópicas para analizarlascon el software Image-Pro Plus 3.0.1 (Media Cybernetic)siguiendo métodos ya descriptos 3. Los resultados seanalizaron a través de pruebas estadísticas no-paramétricasempleando el programa SPSS 10.1 (SPSS Inc. USA). Losresultados obtenidos demostraron que los marcadoresinmunoendocrinos estudiados se expresan en epitelioluminal, en epitelio glandular y en estroma endometrialde vacas en lactancia. La expresión de PR no mostródiferencias significativas al comparar los niveles en epitelioglandular y estroma entre vacas primíparas y pluríparas(p>0,05). Asimismo, similares niveles de expresión fuerondeterminados para los marcadores TGFβ1, TGFβ2 y TGFβ3en dichos estratos celulares. Para el epitelio luminal, no fueposible obtener información cuantitativa debido al reducidonúmero de imágenes obtenidas que contaran con dichaporción de tejido hasta ese momento. Sin embargo, parael caso de PR y TGFβ3 una observación cualitativa de losresultados permitió identificar una intensa expresión enepitelio luminal en relación a lo observado en el estroma dela misma biopsia. Por el contrario, dichas diferencias en laintensidad de marcación no fueron notables para TGF β1 yTGFβ2 entre dichos estratos celulares. Con estas primerasdeterminaciones y en función de los resultados descriptos,se pudo confirmar que los marcadores inmunoendocrinosestudiados se expresan en todos los estratos celulares anivel endometrial durante el diestro tanto en vacas primíparascomo en pluríparas sanas. Esto indicaría que los parámetrosevaluados podrían ser utilizados para determinar posiblesalteraciones en la capacidad de respuesta inmunológica,ampliamente descripta para animales con altas exigenciasmetabólicas/nutricionales. De esta manera, estas exigenciaspodrían verse reflejadas en la expresión de citoquinas confunción reguladora, tales como TGFβ1, TGF β2 y TGF β3estudiadas, así como de otras, y en presencia del receptorde progesterona a nivel endometrial.