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La técnicade tinción Tricrómica de Masson (TM) fue desarrollada en 1929 como una tinciónespecial para diferenciar simultáneamente numerosas estructuras tisulares mediantetres coloraciones: hematoxilina férrica de Wiegert, para teñir los núcleos envioleta, marrón o negro; fucsina ácida-escarlata de Biebrich para colorear loscitoplasmas, la fibrina, y fibras elásticas en rosa, y en rojo la queratina,fibras musculares y la hemoglobina de los eritrocitos; y azul de anilina o fast green que colorean de azul o verde,respectivamente, el mucus y las fibras colágenas (Caputo et al., 2012). Aunquela hematoxilina-eosina (HE) es la coloración de rutina diagnóstica para laidentificación y descripción de procesos patológicos en todos los laboratoriosde histopatología del mundo; la TM también se utiliza como coloración de rutinaen evaluación de algunos órganos como el hígado y el riñón. La TM permiteevidenciar y cuantificar cambios específicos como la reparación tisular(cicatrización) y depósito de colágeno (Suvyk y Effendy, 2012). Además,puede utilizarse para cuantificar vasos sanguíneos en muestras de mucosa oral,en displasia epitelial y carcinoma de células escamosas (Cáceres et al., 2017).También facilita la diferenciación entre el colágeno y el músculo liso enneoplasias, a nivel renal en la evaluación de lesiones glomerulares, enlesiones cardíacas de neovascularización y fibrosis, en distrofias musculares,así como en injurias tóxicas crónicas hepáticas y fibrosis pulmonar. El objetivodel presente trabajo es describir la técnica de coloración TM optimizada en elCentro de Medicina Comparada (CMC) y ejemplificar algunas de las aplicaciones deesta técnica en la rutina de diagnóstico histopatológico veterinario. Se seleccionaroncasos de archivo en los cuales se evidenciaban estructuras y lesiones factiblesde ser evaluadas con esta técnica: un pulmón de un conejo neozelandés con una lesiónde bronconeumonía supurativa crónica; un hígado de un bovino Holando Argentino(HA) con lesiones de intoxicación por flor morada (Echium plantagineum);y un párpado de bovino HA con un carcinoma de células escamosas. Las muestrasde bovinos fueron obtenidas a campo para ser utilizadas como controles ygenerar un banco de casos con lesiones típicas de patologías en esa especie. Lostejidos fueron procesados mediante la técnica de inclusión en parafina y serealizaron cortes seriados de 4 micras de espesor con un micrótomo rotativoLeica (RM 2245). Posteriormente, se realizó la técnica de Masson (Suvyk yEffendy, 2012), con modificaciones como se describe a continuación: los cortesfueron desparafinados para lo cual se colocaron en estufa 15 min a 60°C, en xilol 15 min y 10 min, luego fueron hidratados enalcohol 100° 2 min y 2 min y luego en alcohol 96° 2 min y 2 min, alcohol 70° 2 miny fueron lavados con agua destilada 5 min, posteriormente los cortes fueron sumergidosen solución de Bouin overnight, selavó 5 min en agua corriente, 5 min en agua destilada y se coloreó con hematoxilinaférrica de Weigert 10 min, Fucsina Ácida-escarlata de Biebrich 20 min, la diferenciaciónse hizo con solución de ácido fosfotúngstico con ácido fosfomolíbdico por 20min, tinción con azul de anilina 15 min,y la decoloración con ácido acético al 1% por 2 min. Posteriormente, se realizóla deshidratación en series crecientes de alcohol, aclarados en xilol yfinalmente los cortes fueron montados con bálsamo de Canadá. Además, los mismoscortes se colorearon con la coloración de rutina de Hematoxilina-Eosina (HE).Eldiagnóstico morfológico de la lesión pulmonar evaluada mediante HE fue unabronconeumonía necrotizante y supurativa difusa, subaguda a crónica, activa,severa. El tejido mostró zonas con marcada proliferación de células fusiformesde núcleos grandes y aguzados distribuidos en una matriz compacta de fibraseosinófilas. Mediante la TM se confirmó la proliferación de tejido conjuntivointersticial, los núcleos de los fibroblastos se colorearon violeta oscuro ylas fibras de colágeno se tiñeron en color celeste o azul claro. Además, pudohacerse evidente la presencia de abundante mucus coloreado celeste ocupando loslúmenes bronquiolares y alveolares, y entremezclado con el exudadoleucocitario. Mediante la histopatología con HE del hígado se arribó al diagnósticomorfológico de degeneración, necrosis y pérdida hepatocelular, difusa, severa,con fibrosis severa en puente portal y marcada medio zonal y centrolobulillar,con severa hiperplasia de conductos biliares y megalocitosis. LaTM confirmo la extensa y marcada fibroplasia mediante la coloración azul claroy en otras zonas azul intenso de los puentes de fibrosis formados entre losespacios portales y separando los hepatocitos coloreados de color rosa a rojizo. La HE permitió el diagnóstico de uncarcinoma de células escamosas indiferenciado del tercer párpado. La TM mostróun marcado estroma fibrovascular en la masa neoplásica, evidenciándosenumerosos vasos sanguíneos en una fuerte matriz de colágeno de color azul claroentre las hileras o nidos de células tumorales de color gris azulado. Mediantela TM se pudo evidenciar la fibroplasia en el intersticio pulmonar y confirmarla presencia de un proceso respiratorio crónico. Por otra parte, el abundanteexudado mucoso que no se había evidenciado claramente en la HE, fue fácilmentereconocible mediante la TM. La TM permite la marcación de todos los tipos decolágeno y la intensidad azul está relacionada a la maduración del colágeno,siendo las fibras más inmaduras de color claro y las maduras azul más intenso. Porlo cual, en la TM de hígado es posible que las zonas de color azul más clarosean sugerentes de la presencia de colágeno inmaduro tipo III y las másintensas correspondan a colágeno tipo I, maduro. Sin embargo, para poder clasificarel colágeno en sus diversos tipos se requieren coloraciones específicas comoPicrosirius red o inmunohistoquímica. La utilización de la TM permitióevidenciar claramente un abundante estroma fibrovascular tumoral, con profusotejido conjuntivo y neoformación de vasos sanguíneos entre las célulastumorales en la dermis profunda. El estroma es un componente fundamental parael crecimiento de las células neoplásicas y su evaluación es esencial comocriterio de malignidad. La TM representa una coloración complementaria a la HEde rutina, su precio no es muy elevado, es relativamente sencilla y rápida;además, aporta información certera en relación a diversos procesos patológicos,fundamentalmente aquellos relacionados a proliferación fibrovascular ycicatrización. Por ello, la TM debería contemplarse como tinción complementariapara el diagnóstico en todo laboratorio veterinario.