Caracterización de canales de sodio en una línea celular derivada de trofoblasto humano (BeWo)

SILVANA DEL MÓNACO, YANINA ASSEF, GABRIELA MARINO Y BASILIO A. KOTSIAS

Mar del Plata

Congreso; LII Congreso Anual de SAIC; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La membrana plasmática del sinciciotrofoblasto contiene sistemas de transporte de sodio que participan en la nutrición del feto y en el mantenimiento de la homeostasis celular. En estudios previos confirmamos la presencia del Canal Epitelial de Sodio (ENaC) en la línea celular BeWo, derivada de trofoblasto humano. El objetivo del presente trabajo es continuar la caracterización de los canales de sodio en células BeWo, utilizando la técnica electrofisiológica de patch clamp. Las células cultivadas con aldosterona (100 nM, 12 h) y estimuladas con 8Br-AMPc (100 µM, 25 min) evidenciaron una corriente catiónica entrante sensible al amiloride (IC50 = 1.25 µM), con una permeabilidad de orden Li+ > Na+ > K+ > NMDG (n = 7), que no se observa en células cultivadas en condiciones control (n = 8). Con la configuración de canal único (inside-out) detectamos dos grupos de canales de sodio de baja conductancia en las células tratadas con aldosterona. Un primer grupo de conductancia 5.61 ± 0.68 pS (n = 10) no rectificante dentro de los potenciales estudiados (-120 to 120 mV) y con una frecuencia de aparición de 1 cada 3 canales activos. El segundo grupo presentó una conductancia lineal promedio de 8.96 ± 0.91 pS y una frecuencia de aparición de 1 cada 6 canales activos (n = 5). Ambos grupos presentaron también una baja probabilidad de apertura (0.10 ± 0.05 y 0.09 ± 0.07 a -80 mV, para el primer y segundo grupo, respectivamente), independiente del voltaje aplicado (p > 0.05). Estas características concuerdan con las predichas para canales tipo ENaC, presentes en otros tejidos humanos. Las diferencias observadas entre grupos podrían deberse a variaciones en la composición de subunidades del canal o a distintas influencias de proteínas accesorias. Estos resultados se suman a la caracterización electrofisiológica y molecular del ENaC en la línea celular BeWo realizada previamente, confirmando la presencia, actividad y regulación hormonal del canal en células de placenta humana.