Canales de cloruro en una línea celular derivada de trofoblasto humano (BeWo). G

MARINO GI.; DEL MÓNACO S.; ASSEF Y.; KOTSIAS BA.

Mar del Plata

Congreso; LIII Congreso Anual de SAIC; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El Canal de Cloruro CFTR y el Canal Epitelial de Sodio (ENaC) se localizan en la membrana apical de epitelios absortivos y se encargan del balance hidroelectrolítico en los mismos. El sinciciotrofoblasto (SCT) contiene transportadores de Na+ y Cl- que participan en la nutrición del feto y en el mantenimiento de la homeostasis celular. La presencia de CFTR fue descripta en SCT de placenta humana y hemos evidenciado la expresión del ENaC en este tejido y en la línea celular BeWo, derivada de trofoblasto humano. El objetivo del presente trabajo es caracterizar el transporte de Cl- en células BeWo, utilizando técnicas electrofisiológicas y de biología molecular. Mediante la técnica de patch clamp en la configuración de célula entera, detectamos corrientes de Cl- con una conductancia saliente macroscópica de 24.5 ± 5.9 pS/pF, determinada entre 0 y 100 mV (n=6). Los valores de corrientes fueron normalizados por la capacitancia de membrana, cuyo valor promedio para estas células fue 41.0 ± 20.2 pF. Estos datos se correlacionaron con los obtenidos a partir de registros de canal único, utilizando la configuración inside-out de patch clamp, donde hasta el momento hemos identificado dos tipos de canales de Cl-. Uno que presentó una conductancia intermedia de 73.8 ± 33.0 pS (n=3) y el otro de corrientes más pequeñas con una conductancia de 13.1 ± 8.5 pS (n=2). La baja conductancia del segundo tipo de canal sería compatible con la ya observada para canales tipo CFTR estudiados en otros sistemas. Mediante estudios por RT-PCR del canal CFTR en las células BeWo observamos la banda esperada a ~295 pb y por Western blot detectamos la banda típica de ~160 KDa lo que nos permitió confirmar que el canal se expresa en las células BeWo. Podemos concluir que las células BeWo, utilizadas como modelo de trofoblasto humano, expresan canales de cloruro funcionales. Nuestros resultados podrían aportar al conocimiento del transporte de cloruro y su relación con el de sodio, los cuales podrían estar involucrados en la fisiopatogenia de la preeclampsia.