Efecto de la aldosterona y la tripsina sobre la actividad del Canal Epitelial de Sodio (ENaC) en c¨¦lulas BeWo.

DEL MÓNACO S.; MARINO G.; ASSEF Y.; KOTSIAS BA.

Mar del Plata

Congreso; LIV Congreso Anual de SAIC; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La línea celular BeWo deriva de trofoblasto humano y ha sido utilizada para la investigación del transporte placentario. Hemos demostrado que estas células expresan el Canal Epitelial de Sodio (ENaC), molecular y funcionalmente. El objetivo de este trabajo es determinar la participación del canal en la migración de las células BeWo y estudiar el efecto de la tripsina sobre la actividad del mismo. Evaluamos la capacidad migratoria de las células realizando una herida en las monocapas y midiendo el porcentaje cicatrizado a las 6 h. Las células BeWo estimuladas con aldosterona (100 nM, 12 h) cubren una mayor superficie de las heridas (38.0 +/- 5.4 %), que las cultivadas sin estímulo (20.6 +/- 7.0 %) o expuestas a amiloride 10 uM (13.7 +/- 3.6 %), (p < 0.05, n = 16). El aumento de la cicatrización depende de la migración celular y no de la proliferación de las mismas. Mediante inmunocitoquímica observamos que las subunidades del canal se expresaron en mayor medida en las células del borde de la herida. Oligonucleótidos antisentido dirigidos contra alpha-ENaC redujeron la capacidad de desplazamiento de las céulas (p < 0.001, n = 16). Se comprobó que los mismos disminuyen la síntesis de la proteína alphaENaC (n = 3), y las corrientes de sodio activadas por aldosterona (p < 0.05, n = 4), (patch clamp, célula entera). Por último evaluamos el efecto de la tripsina sobre las corrientes de células BeWo tratadas con aldosterona. Observamos un aumento de las corrientes en todos los voltajes analizados estimulando con tripsina 10 ug/mL (p < 0.05, n = 7), que se inhibieron luego con amiloride 10 uM (p < 0.05, n = 4). Nuestros resultados suman evidencias sobre la presencia del ENaC en placenta y en células BeWo, y su participación en la migración celular. En preeclampsia, una expresión reducida del ENaC dados los niveles más bajos de aldosterona circulante generar complicaciones en la normal actividad placentaria, tanto a nivel de transporte como en la capacidad invasiva del trofoblasto.