Mecanismo de acción de la glibenclamida como bloqueante del canal de cloruro con rectificación saliente (ORCC) en células K562

ASSEF Y. Y KOTSIAS BA.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LXVII Congreso Anual de SAIC; 2002

Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas

En la línea celular K562 de una leucemia mieloide crónica humana, mediante la técnica de patch clamp se observó un canal con selectividad aniónica, baja permeabilidad al gluconato (PGluc / PCl- = 0.14) e inducido por forskolina (20 mM), un activador de la adenilato ciclasa. El canal presenta una mayor conductancia a pulsos positivos:  19.1± 17.3 pS y 39.8 ± 7.8 pS  (n=10) para las corrientes entrantes y salientes, respectivamente. La actividad del canal es bloqueada por glibenclamida cuando es agregada en el medio intracelular. La inhibición se incrementa con el  aumento de la concentración del bloqueante: Ki (60 mV) ± SD = 66.2 ± 11.0 mM (n=5) y está caracterizada por una disminución de la probabilidad de apertura (Po) del canal sin afectar la conductancia individual: Po control ± SD = 0.82 ± 0.12; Poglib 50 ± SD= 0.54 ± 0.11, (60 mV, n=18). La disminución de la probabilidad de apertura es independiente del voltaje en el rango de concentraciones de glibenclamida estudiada (25-100 mM) lo que hace suponer que el bloqueante se une a un lugar cercano al poro del canal.  El efecto sobre la probabilidad de apertura se debe a una disminución de la constante de tiempo abierto. El canal estudiado comparte todas sus características con el ORCC encontrado en otros tipos celulares y que es modulado por el canal regulador de la conductancia transmembrana en la fibrosis quística (CFTR), pero aún no fue descrito en células de origen no epitelial.