INVESTIGADORES
GARCIA Maria Laura
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización genómica y funcional del Citrus psorosis virus, el miembro tipo de una nueva familia de virus: Ophioviridae
Autor/es:
MARIA LAURA GARCIA
Lugar:
BUENOS AIRES
Reunión:
Conferencia; CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGIA; 2008
Resumen:
<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> El virus de la Psorosis de los cítricos (CPsV, Citrus psorosis virus) produce daños importantes en la citricultura de nuestro país ya que se disemina por un vector que aún se desconoce. En nuestro laboratorio lo hemos purificado y caracterizado determinando su morfología a partir de la cual le dimos el nombre al nuevo género, “ophio” virus. Su genoma es tripartito, a RNA de cadena simple y de polaridad negativa. Su estructura consta de nucleocápsides circulares abiertas no envueltas que pueden presentarse también en forma colapsada, dando una estructura pseudo lineal. El RNA1 de CPsV codifica para la polimerasa viral (280K), y otra proteína de función desconocida (24K) en su extremo 5´ viral, separados por una región intergénica de 109 nt. El RNA 2 codifica una proteína (54K) cuya función también se desconoce, y el RNA 3 el gen de la proteína de cubierta viral (48K). Hemos determinado la localización genómica del gen de la proteína 48K y la polimerasa viral, y avanzado en la determinación de la función de los distintos genes virales. El genoma sólo contiene 4 probables proteínas, estando cada una de ellas probablemente involucradas en varias funciones del ciclo viral. Para simplificar su estudio desarrollamos varias herramientas, como las fusiones a GFP y vectores virales, y la generación de plantas transgénicas que expresan las proteínas 48K y 54K. En ensayos preliminares utilizando la estrategia de complementación del movimiento de vectores de PVX defectivos en su movilidad, encontramos que la proteína 54K estaría involucrada en el movimiento del CPsV de célula a célula. Además, observaciones en ensayos de reversión del silenciamiento establecido en plantas de N. benthamiana 16C nos indicarían que el virus tendría la capacidad de revertir el silenciamiento génico post transcripcional, siendo la proteína 54K la probable supresora del mecanismo de defensa de la planta. A partir de nuestras primeras observaciones mediante microscopia electrónica y del hallazgo de la peculiar estructura de CPsV, otros investigadores encontraron nuevos virus de estructura similar que luego fueron estudiados en su organización genómica, su secuencia nucleotídica, y proteínas virales. A partir de la secuencia amino-acídica de la replicasa (RdRp) de CPsV y otros dos ophiovirus realizamos un análisis que estableció su relación taxonómica a Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Bornaviridae y Filoviridae, y Varicosavirus, con un motivo C típico de la RdRp de Orthomyxoviridae, Arenaviridae y Bunyaviridae, lo que nos sugirió su separación en un nuevo género viral dentro de los virus con genomas a RNA negativos. En el IX Congreso Internacional de Taxonomía de virus (ICTV) todos los investigadores que hemos aportado información acerca de estos nuevos virus vegetales propusimos a este género como una familia, Ophioviridae, aplicando además otros criterios de análisis como la complementaridad de los extremos 5´ y 3´, rango de hospedantes, y vectores que los propagan