Características feno-genotípicas de E. coli O157:H7 en bovinos de feedlot y pastoreo en Argentina

PADOLA, NORA L.; ETCHEVERRÍA, ANALÍA I.; SANZ, MARCELO, E; ARROYO, GUILLERMO H.; LUCCHESI, PAULA M.A.; BLANCO, JESÚS E.; BLANCO, JORGE; BLANCO, MIGUEL; PARMA, ALBERTO E.

Ciudad de Buenos Aires. Argentina

Congreso; XVII Congreso Latinoamericano de Microbiología y X Congreso Argentino de Microbiología. Buenos Aires; 2004

Asociación Latinoamericana de Microbiología. Asociación Argentina de Microbiología.

Resumen: El bovino es reservorio de Escherichia coli verocitotoxigénicos (VTEC) y de un subgrupo de ellos, E. coli enterohemorrágicos (EHEC) que causan en el hombre diarrea sanguinolenta, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico. El sistema de engorde a corral (feedlot) constituye un ambiente propicio para el desarrollo de E. coli O157 ya sea por el hacinamiento o por el cambio alimentario sufrido por los animales. El objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de E. coli O157:H7 en bovinos de un feedlot y en pastoreo y determinar las características feno-genotípicas de los aislamientos. Se estudiaron 59 bovinos de un feedlot, realizando 11 muestreos cada 15 días y 68 bovinos en pastoreo con 4 muestreos cada 15 días. Los animales pertenecían al mismo establecimiento, aunque no había contacto entre los de pastoreo y aquellos encerrados en los corrales. La única instalación compartida fue la manga, pero nunca estuvieron en ella ambos grupos en forma simultánea. Los muestreos se realizaron por hisopado rectal y posteriormente se sembraron en placas de agar MacConkey. La zona de crecimiento confluente se cultivó en caldo Luria Bertani para obtención de ADN por lisis celular en caliente. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se empleó para detectar genes codificantes de verocitotoxinas 1 y 2 (VT1 y VT2). En las muestras positivas a vt se realizó PCR para eae g , característico de O157 y posterior captura inmunomagnética (Dynabeads anti-E. coli O157). Estos aislamientos también se analizaron por PCR específica para detectar el gen eae que codifica para intimina y el plásmido de 60MDa (Mp).  Además, se estudiaron los perfiles genotípicos de los distintos aislamientos mediante la técnica de análisis de ADN polimórfico amplificado al azar (RAPD).Como resultado de este trabajo E. coli O157:H7 se encontró en 4 de 59 (6,7%) bovinos en feedlot (muestreos 2 y 3) y 6 de 68 (8,82%) bovinos en pastoreo (último muestreo). Las cepas aisladas portaron el mismo genotipo de virulencia: vt2+, eae+ y Mp+. Ninguna cepa fermentó el sorbitol. Las bacterias fueron seroagrupadas como O157 en nuestro laboratorio (E. coli O157 Test Kit, Oxoid) y confirmadas en el Laboratorio de Referencia de E. coli de la Universidad de Santiago de Compostela (LREC). Con el “primer” utilizado en el análisis por RAPD, se detectaron 2 perfiles genéticos diferentes entre los aislamientos obtenidos de bovinos en feedlot. Uno de los perfiles fue compartido con los aislamientos de bovinos en pastoreo. Estos resultados, juntamente a nuestras publicaciones previas, demuestran la transmisión de cepas entre animales que comparten el habitat o instalaciones de un establecimiento. El mayor hacinamiento y contacto con operarios hace que los feedlot representen también un mayor riesgo para la salud pública.