Efectos de la Galectina-1 sobre la adhesión de las células de carcinoma hepatocelular, HepG2, y sobre la polarización de sus membranas

TRONCOSO, M.F., ESPELT, M.V., CARABIAS, P., RABINOVICH, G.A. Y WOLFENSTEIN DE TODEL, C

Mar del Plata- Argentina

Congreso; LII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), LV Reunión de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2007

ociedad, Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Inmunología y Sociedad Argentina de Fisiología

La galectina-1 es una proteína con afinidad por b-galactósidos que interviene en la regulación del crecimiento, adhesión, apoptosis y metástasis. Un factor clave para la progresión de tumores es la migración celular y el primer evento involucrado en el fenómeno migratorio es la polarización de las células tumorales. Las células epiteliales hepáticas, al ser cultivadas a alta densidad, adoptan un fenotipo caracterizado por la formación de canalículos biliares (CB). El primer objetivo fue investigar el efecto de la galectina-1 recombinante (rGal-1) sobre la adhesión de células de hepatocarcinoma humano, HepG2. Observamos, mediante la tinción con Cristal Violeta, que la rGal-1 (400 µg/ml, 14 µM) incubada en forma soluble con la suspensión de células promovió significativamente la adhesión (149±18 %, tiempo de incubación 1h) respecto a las células control (100 %). Este efecto fue dependiente de la dosis observándose la máxima respuesta a la concentración de 14 µM. Además, la adhesión de las células aumentó significativamente (138±9 %) cuando éstas se cultivaron en placas recubiertas con la rGal-1 inmovilizada (20 µg/pocillo). El segundo objetivo fue evaluar el efecto de rGal-1 sobre la polarización de las células HepG2. Los CB se visualizaron por microscopía de fluorescencia utilizando faloidina-TRITC. Simultáneamente, se utilizó el colorante nuclear Hoechst y la polaridad celular se estimó como la media ± error estándar de CB/100 células. En presencia de la rGal-1 (7 µM) la polaridad a las 48h aumentó (15±2) con respecto al control (8±2). Luego de 72h, se observó la misma polaridad en las células control (12±4) y en las tratadas (15±1), sin embargo, la Gal-1 indujo un aumento en el área relativa de los CB. Estos resultados demuestran que la Gal-1 promueve la adhesión de las células HepG2 y la hiperpolarización de sus membranas y sugieren su posible rol en la diferenciación hepática durante la embriogénesis o la transformación maligna.