Identificación y caracterización de un gen relacionado con el modo reproductivo en E. curvula

PASTEN MARÍA CIELO; SELVA JUAN PABLO; ECHENIQUE VIVIANA C; GARBUS INGRID,

Rosario

Simposio; Simposio de Genómica Funcional de Plantas; 2017

El pasto llorón (Eragrostis curvula) es una gramínea perenne comúnmente utilizada como forrajera en Argentina dada su capacidad para resistir la sequía y adaptarse a zonas semiáridas. Presenta un número básico de cromosomas de x = 10, incluyendo citotipos con diferentes niveles de ploidía. Los escasos diploides existentes presentan reproducción sexual, mientras que los genotipos poliploides se reproducen mediante apomixis diplospórica, es decir que sus semillas son genéticamente idénticas a la madre. Nuestro grupo de trabajo generó un microarreglo basado en ESTs y genotecas de cDNAs de esta especie. La hibridación con ARN de inflorescencias de genotipos sexuales y apomícticos, permitió identificar mediante análisis bioinformático diferentes genes candidato que estarían regulando el modo reproductivo en E. curvula. Para este trabajo se comenzó a estudiar la implicancia de un gen que presenta identidad con un factor de splicing. Para esto, se diseñaron varios pares de cebadores específicos basados en el cDNA del gen candidato, que fueron utilizados a través de la técnica de PCR para amplificar ADNs provenientes de genotipos con diferente modo de reproducción y nivel de ploidía. Se pudo determinar que este gen se encuentra en los genotipos con reproducción apomíctica y está ausente en los sexuales, para todas las combinaciones de cebadores ensayadas. Es decir, la diferencia de expresión detectada a través del microarreglo se debe a la ausencia del gen en los genotipos sexuales. La secuenciación de los amplicones nos permitirá diseñar sondas para verificar la expresión de este gen mediante hibridación in situ.