EVALUACIÓN DE MULTILOCUS SEQUENCE TYPING SOBRE MUESTRAS BIOLÓGICAS

JUAN JOSÉ LAUTHIER; NICOLÁS TOMASINI; MARÍA MERCEDES MONJE RUMI; PAULA GABRIELA RAGONE; ANAHÍ MAITÉN ALBERTI DAMATO; ALEJANDRO UNCOS; MIGUEL ÁNGEL BASOMBRÍO; PATRICIO DIOSQUE

Mar del Plata

Congreso; IX Congreso Argentino de Parasitología y Enfermedades Parasitarias; 2011

Sociedad Argentina de Protozoología

La tipificacion por secuenciacion multilocus (MLST, Multilocus Sequence Typing), es una tecnica que permite identificar una gran variabilidad genetica dentro y entre las diferentes unidades discretas de tipificacion (DTU, Discrete Typing Units) de Trypanosoma cruzi (TC). En trabajos previos definimos un esquema de tipificacion basado en el analisis de 10 fragmentos de genes metabolicos sobre un set de cepas de referencia y un panel de clones representativos de la diversidad de TC en nuestra area de estudio en la provincia de Chaco. Esta tecnica mostro un alto poder de resolucion en comparacion a tecnicas estandar de tipificacion de TC. Debido al riesgo de un efecto de seleccion de clones durante los procesos de aislamiento de parasitos, resulta de interes contar con herramientas que permitan identificar diferentes genotipos del parasito antes de cualquier posible seleccion. Para evaluar la utilidad de MLST como herramienta para aplicar en el estudio directo sobre muestras biologicas, se realizaron ensayos sobre muestras provenientes de ratones y vinchucas infectadas artificialmente con diferentes genotipos de TC circulantes en la misma zona de estudio. Los resultados obtenidos muestran que es necesario contar con muestras con altas parasitemias, ya que muestras con parasitemias muy bajas (. menores a 800 parasitos/mL) son indetectables mediante estos targets. Estos resultados sugieren que esta tecnica no seria de utilidad sobre muestras de pacientes cronicos, pero si podria ser empleada sobre muestras biologicas de pacientes agudos (incluyendo casos congenitos) y vectores, ya que en estos casos las parasitemias suelen estar dentro del rango de deteccion obtenido en estos ensayos.