"Estudio del efecto de poligodial y floretina sobre la interacción de ANS con liposomas. Dependencia con la temperatura".

CUTRO ANDREA; ROVERI OSCAR A.

La Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; • XXXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofisica; 2008

sociedad argentina de biofísica

Estudio del efecto de poligodial y floretina sobre la interacción de ANS con lipsomas. Dependencia con la temperatura. Andrea C. Cutró, Oscar A. Roveri Área Biofísica, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmaceúticas, Universidad Nacional de Rosario, Suipacha 531, S2002LRK Rosario, Argentina e-mail acutro@fbioyf.unr.du.ar Previamente ha sido informado que modificadores del potencial dipolar inhiben la síntesis de ATP en partículas submitocondriales (SMP) [1] y [2]. Poligodial disminuyó la afinidad de las SMP por ANS [3], anión permeante hidrofóbico capas de unirse a proteínas y a lípidos. Dado que ambos compuestos se encuentran presentes en SMP se decidió estudiar el efecto de modificadores del potencial dipolar interno sobre la unión de ANS a liposomas de fosfolípidos. Poligodial inhibe completamente (IC50= 270 µM) el aumento de fluorescencia que compaña la unión de 80 µM de ANS a liposomas de DMPC (0.1 µm) a 33ºC (T>Tc). En cambio a 13 ºC el efecto máximo es sólo un 31 % de inhibición, obteniéndose en este caso la mitad del efecto máximo con 22 µM de poligodial. Poligodial no afecta la eficiencia de fluorescencia del ANS unido, siendo por tanto los efectos inhibitorios observados atribuíbles fundamentalmente a la disminución del número de sitios de unión y en menor medida a una disminución de la afinidad aparente de la bicapa por ANS. Floretina produjo efectos similares a los de poligodial a temperaturas mayores que la Tc (Inhibición máxima = 90 % e IC50 = 70 µM), temperaturas a las cuales la bicapa está en estado líquido cristalino. En estas condiciones, la presencia de floretina produce un aumento de la constante aparente de discociación de ANS (Kd=54 ± 2 y 65 ± 1µM, en ausencia y en presencia de 78 µM floretina, respectivamente). Asimismo, la fluorescencia estimada para la saturación de la bicapa con ANS en presencia de 78 µM floretina fue un 57 % de la obtenida en su ausencia. En cambio, a temperaturas a las que la bicapa estaría en fase gel (13ºC) el efecto de floretina fue completamente opuesto al observado a T>Tc. En estas condiciones, floretina aumentó hasta 2.5 veces la fluorescencia (la mitad del efecto máximo fue producida por 35 µM floretina). [1] Castelli, MV et al. Biochem Pharmacol, 2005, 70, 82-89 [2] Castelli, MV. et al. XXXV Reunión Annual de SAB, 2006, BLB#7. [3] Castelli, MV et al XXXIV Reunión Anual de SAB, 2005, 51.