Perfil proteico de vesículas extracelulares y proteínas solubles secretadas por Echinococcus granulosus s.l. y Echinococcus multilocularis

ANCAROLA ME; MILES S; MALDONADO L; BREHM K; ROSENZVIT M; MOURGLIA ETTLIN G; CUCHER M

Congreso; XXX Reunión de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2018

Los cestodes son platelmintos con complejos ciclos de vida que pueden causar enfermedades zoonóticas severas como la equinococosis, que es producida por parásitos del género Echinococcus. Las especies de este género con mayor importancia sanitaria son Echinococcus granulosus sensu lato (s.l.) y Echinococcus multilocularis. En ambos casos, la fase inicial de la infección en el hospedero intermediario es asintomática y puede prolongarse por años. El parásito se establece en diferentes órganos, principalmente en hígado, donde se desarrolla el estadio larval de metacestode. El metacestode está conformado por una capa exterior acelular llamada capa laminar, una capa interna celular llamada capa germinal y está relleno de fluido (líquido hidatídico).El diagnóstico de la equinococosis se realiza principalmente a través del análisis de imágenes que detectan el parásito ya desarrollado, mientras que los ensayos serológicos son complementarios ya que tienen baja sensibilidad. Recientemente, demostramos que los metacestodes de E. multilocularis producen vesículas extracelulares (VE) pero las mismas son retenidas por la capa laminar impidiendo que alcancen el exterior del parásito. Las VE son estructuras redondeadas con bicapa lipídica que transportan moléculas como ácidos nucleicos, proteínas y lípidos. En este trabajo, analizamos el perfil de secreción proteico del estadio de metacestode de E. granulosus s.l. y E. multilocularis teniendo en cuenta el mecanismo de secreción (proteínas secretadas de forma soluble o asociadas a VE) así como también la dirección en la cual son secretadas (medio extra-parasitario o líquido hidatídico).Para ello, muestras de líquido hidatídico y medio condicionado por metacestodes de ambas especies se sometieron a un protocolo de centrifugación diferencial y ultracentrifugación, obteniendo fracciones enriquecidas en VE o proteínas solubles que se analizaron por LC-MS/MS. Este trabajo constituye el primer reporte sobre el perfil de expresión proteico secretado activamente por los metacestodes de Echinococcus spp. hacia el medio extra-parasitario (i.e., el hospedero) aportando información relevante para la búsqueda racional de marcadores diagnósticos.